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HRP-Streptavidin|辣根过氧化物酶-链霉亲和素的描述

2024-09-02 [342]


HRP-Streptavidin|辣根过氧化物酶-链霉亲和素

辣根过氧化物酶 - 链霉亲和素(HRP-Streptavidin)是一种具有特定功能的复合物。

一、分子结构特点

辣根过氧化物酶(HRP)部分:

HRP 是一种含血红素的糖蛋白,由多个亚基组成。其活性中心含有一个铁卟啉结构,能够催化过氧化氢(H₂O₂)对底物的氧化反应。

HRP 具有较高的催化活性和稳定性,在生物化学和免疫分析等领域得到广泛应用。

链霉亲和素部分:

链霉亲和素是一种由链霉菌分泌的蛋白质,对生物素具有较高的亲和力。它由四个相同的亚基组成,每个亚基都能结合一个生物素分子。

链霉亲和素具有很强的特异性结合能力和稳定性,常用于生物标记、检测和分离等领域。

二、物理性质

外观:通常为淡黄色或棕色粉末。

溶解性:可溶解于适当的缓冲液中,如磷酸盐缓冲液(PBS)等。

三、化学性质

酶催化活性:HRP 能够催化 H₂O₂ 对多种底物的氧化反应,产生有色或发光产物。常用的底物包括邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)等。

生物素结合能力:链霉亲和素与生物素之间的结合具有较高的亲和力和特异性。这种结合不受大多数化学和物理因素的影响,非常稳定。

四、应用领域

免疫分析:

HRP-Streptavidin 可用于酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫组织化学(IHC)、免疫印迹(Western blot)等免疫分析技术中。

在这些技术中,生物素标记的抗体或其他生物分子与 HRP-Streptavidin 结合,通过 HRP 的催化作用产生可检测的信号,从而实现对目标分子的检测和定量分析。

核酸检测:

HRP-Streptavidin 可用于核酸杂交、原位杂交等核酸检测技术中。生物素标记的核酸探针与目标核酸杂交后,与 HRP-Streptavidin 结合,通过 HRP 的催化作用产生信号,实现对目标核酸的检测。

生物标记和分离:

HRP-Streptavidin 可用于生物分子的标记和分离。生物素标记的生物分子与 HRP-Streptavidin 结合后,可以通过酶催化反应产生信号进行检测,或者利用链霉亲和素与生物素的高亲和力进行分离纯化。

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