HRP-CHO|辣根过氧化物酶-醛基的描述


辣根过氧化物酶-醛基(HRP-CHO)是一种将醛基(-CHO)与辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)结合的化合物,以下是其详细介绍:
结构特点
辣根过氧化物酶是一种含四个二硫键的单链多肽,由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,含18%碳水化合物。醛基通过与HRP分子中的特定基团反应而结合,形成HRP-CHO复合物。
制备方法
高碘酸盐氧化法:将HRP溶解在适当的缓冲液中,加入高碘酸钠溶液,在低温下反应一定时间,使HRP的糖基被氧化成醛基,然后通过透析或其他纯化方法去除未反应的高碘酸钠和其他杂质,得到HRP-CHO。
试剂盒法:如Abbkine的LliKine™辣根过氧化物酶(HRP)偶联试剂盒,提供了一种简单快速的方案,将HRP直接偶联到含有自由氨基的蛋白质、多肽或其他配体上。
功能特性
催化活性:HRP-CHO保留了辣根过氧化物酶的催化能力,能够催化多种底物的氧化反应,如在过氧化氢存在下,催化底物产生颜色变化或化学发光信号。
反应性基团:醛基作为反应性基团,能够与氨基酸、蛋白质或其他生物分子中的氨基发生反应,形成稳定的共价结合,可用于标记抗体、蛋白质或其他生物分子,实现信号放大和检测。
应用领域
免疫检测:在酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印迹(Western blot)、免疫组化等实验中,HRP-CHO可作为标记酶,与抗体结合,用于检测抗原或抗体的存在和含量。
生物传感器:可用于构建生物传感器,通过与目标生物分子结合,产生可检测的信号变化,用于检测生物分子、药物和环境污染物等。
化学合成:醛基可以参与多种化学反应,如缩合反应和还原反应,为药物合成和材料科学提供多种合成路径。
注意事项
保存条件:HRP-CHO应在冷藏条件下(-20℃)保存,以保持其活性和稳定性。
使用前处理:使用前需根据具体实验要求进行适当的处理,如溶解、稀释等,并注意避免反复冻融。
关于我们:
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