链霉亲和素(SA)修饰金纳米颗粒150nm的技术

以下是关于链霉亲和素（SA）修饰150nm金纳米颗粒的详细说明，涵盖制备、特性及应用：

1. 基本特性

• 金纳米颗粒（AuNPs）核心：

• 尺寸：150nm（可通过动态光散射DLS或透射电镜TEM验证）。

• 表面等离子共振（SPR）：在可见光区（约520-600nm）有强吸收，可用于比色检测。

• 稳定性：需表面修饰（如SA）防止聚集，SA提供负电荷增强胶体稳定性。

• 链霉亲和素（SA）修饰：

• 结合位点：每个SA可结合4个生物素分子，实现高密度生物分子偶联。

• 偶联方式：通常通过静电吸附或共价连接（如羧基-氨基交联）将SA固定在AuNPs表面。

2. 制备方法

步骤示例：

1. AuNPs合成：

• 柠檬酸钠还原法（适用于小尺寸）：需调整方法（如种子生长法）制备150nm AuNPs。

• 表征：UV-Vis光谱（SPR峰红移）、TEM（确认单分散性）。

2. SA修饰：

• 活化AuNPs：用带羧基的 linker（如11-巯基十一烷酸，MUA）修饰AuNPs，EDC/NHS活化羧基。

• SA偶联：将SA与活化后的AuNPs孵育（pH 7.4 PBS缓冲液，室温2小时）。

• 封闭：加入BSA或乙醇胺封闭未结合位点。

3. 纯化：

• 离心（如10,000rpm, 15分钟）去除游离SA，重悬于缓冲液（如含0.1% BSA的PBS）。

3. 关键质量控制

• 结合效率：

• BCA法：测定上清液中未结合的SA浓度。

• SDS-PAGE：验证SA是否成功偶联。

• 功能性测试：

• 加入生物素化荧光分子（如FITC-生物素），通过荧光显微镜或流式细胞仪检测信号。

4. 应用方向

• 免疫检测：

• 侧向层析：作为信号放大标签，检测生物素化抗体（如新冠病毒抗原检测）。

• ELISA替代：SA-AuNPs增强比色信号，提升灵敏度。

• 分子诊断：

• DNA检测：结合生物素化探针，用于核酸杂交（如SARS-CoV-2 RNA检测）。

• 细胞标记：

• 靶向标记细胞表面生物素化受体。

• 药物递送：

• 装载生物素化药物，实现靶向释放（需优化尺寸以穿透血管屏障）。

关于我们:

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