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Streptavidin PLA Particles,链霉亲和素修饰PLA微球的描述

2025-10-12 [29]

链霉亲和素修饰PLA微球是通过化学方法将链霉亲和素蛋白共价结合到聚乳酸(PLA)微球表面形成的功能化颗粒,结合了PLA的生物相容性、可降解性以及链霉亲和素对生物素的高特异性结合能力,在生物医学领域具有重要应用价值。

一、特性

  1. 高特异性结合:链霉亲和素对生物素具有较高的亲和力(亲和常数约10⁻¹⁵ M),可特异性捕获生物素标记的分子(如抗体、核酸、蛋白质等),形成稳定复合物。

  2. 良好的悬浮性与分散性:PLA微球粒径可控、表面可电荷调节,使微球在缓冲液中悬浮稳定,不易聚集。

  3. 生物稳定性强:链霉亲和素即便在化学交联或包埋后仍保留生物活性,且与生物素结合不易解离,确保功能稳定性。

  4. 功能扩展性强:微球表面残余活性基团(如羧基、羟基)可进一步修饰荧光染料、抗体、酶等,拓展应用范围。

  5. 高比表面积:提供大量结合位点,可高效负载生物素标记的分子,提高反应效率。

二、制备方法

  1. PLA微球制备

    • 乳液聚合法:将PLA溶于有机溶剂中,加入乳化剂形成油包水型乳液,通过挥发去除溶剂后固化得到PLA微球。

    • Stöber法:适用于制备二氧化硅-PLA复合微球,通过水解缩合反应在微球表面引入活性基团。

  2. 表面活化处理

    • 利用化学方法(如使用氧化剂、酸或碱等)对PLA微球表面进行处理,使其表面产生活性基团(如羟基、羧基等),以便后续与链霉亲和素进行共价结合。

    • 常用的活化剂有戊二醛、碳二亚胺等。

  3. 共价结合链霉亲和素

    • 将链霉亲和素与活化后的PLA微球在适当的条件下(如一定的温度、pH值和反应时间)进行反应,使链霉亲和素通过共价键连接到微球表面。

    • 反应过程中需控制条件以确保结合效率和活性保留。

  4. 脱除未反应的链霉亲和素

    • 反应结束后,通过洗涤、离心等方法去除未与PLA微球结合的链霉亲和素,确保产品纯度。

三、储存注意事项

  1. 储存条件

    • 一般需密封,在-20℃的环境中冷藏保存,切勿冻存,以保持其稳定性和活性。

    • 避免高温环境,以防PLA微球融熔变形或粘结成团。

  2. 使用前处理

    • 在使用前需要用纯水或所用缓冲溶液清洗2-3遍,以去除可能残留的杂质和未结合的物质。

  3. 使用过程中注意事项

    • 应尽量避免长时间超声破坏微球表面,因为超声可能会导致微球结构的损坏或链霉亲和素从微球表面脱落。

    • 注意避免混入多价阳离子和有机溶剂等可能影响微球性能的物质。

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