cas：66640-86-6，Biotin hydrazide HCl，生物素酰肼的介绍
2025-11-02
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Biotin hydrazide HCl（生物素酰肼盐酸盐）是一种重要的生物标记试剂，其核心结构由生物素基团、酰肼基团（-NH-NH₂）和盐酸盐（HCl）组成，具有特殊的理化性质和广泛的应用场景。
一、理化性质
外观与状态：亮黄色或白色固体粉末，纯度通常≥95%。
分子式与分子量：分子式为C₁₀H₁₉ClN₄O₂S，分子量约为294.80 g/mol。
溶解性：
溶于大部分有机溶剂（如DMSO，溶解度≤20 mg/mL）。
溶于水，盐酸盐形式显著提高了水溶性，便于在水相缓冲液中反应。
熔点与沸点：熔点为245-247℃，沸点预测值为633.1±40.0℃（760 mmHg）。
稳定性：
盐酸盐形式更稳定，便于长期储存，避免游离酰肼的氧化变质。
需避光保存，防止光照引起的分解。
结构式：
二、核心功能
酰肼基团的反应特异性：
酰肼基团（-NH-NH₂）可与醛基（-CHO）或酮基（-CO-）在弱酸性条件（pH 4.0-6.0）下发生缩合反应，生成稳定的腙键（-C=N-NH-）。
这种反应对醛/酮基具有高度特异性，不与氨基、羧基等其他基团反应，可实现精准标记。
盐酸盐形式的优势：
显著提高生物素酰肼的水溶性，使其能在水相缓冲液中溶解并反应，无需添加有机溶剂。
形式更稳定，便于长期储存。
生物素的高亲和性：
偶联后可通过亲和素/链霉亲和素系统高效富集目标分子，富集效率可达90%以上。
适用于后续的检测、分离或纯化。
三、应用场景
糖蛋白标记与纯化：
通过高碘酸氧化糖蛋白的糖链生成醛基，再与Biotin hydrazide HCl偶联，实现糖蛋白的特异性生物素化。
标记后的糖蛋白可通过链霉亲和素包被的磁珠或琼脂糖珠进行纯化，获得高纯度糖蛋白，用于糖链结构分析或功能研究。
核酸标记：
可与醛基修饰的DNA/RNA反应，制备生物素化核酸探针。
用于Southern blot、Northern blot等杂交实验，提高检测灵敏度。
蛋白质碳基化检测：
作为探针用于检测蛋白质碳基化，这是一种由活性氧或脂质氧化产物引起的不可逆翻译后修饰。
在pH 5.5条件下，Biotin hydrazide HCl可专一性地衍生化碳基基团，便于测量生物样品中的碳基化蛋白质。
细胞表面标记：
用于生物素化并分离细胞表面糖蛋白，有助于研究细胞表面分子的功能和相互作用。
四、使用注意事项
安全防护：
操作时佩戴手套、护目镜及实验服，避免直接接触或吸入粉末。
避免形成粉尘和气溶胶，使用非火花工具，防止静电放电引起的火灾。
废弃物按化学危险品处理，不可随意丢弃。
储存条件：
短期保存：2-8℃，避光。
长期保存：建议冷藏，保持容器密封，防止受潮和光照。
反应优化：
确保目标分子含醛基或酮基，或通过氧化处理生成醛基。
控制反应pH在4.0-6.0范围内，以获得最佳标记效率。
反应后需通过透析、柱层析等方法去除未结合试剂。
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