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Desthiobiotin NHS Ester,cas:80750-24-9的性质

2025-11-12 [39]

Desthiobiotin NHS Ester 是一种结合了脱硫生物素(Desthiobiotin)与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS Ester)功能的化学试剂,广泛应用于生物化学和分子生物学领域,尤其在生物分子标记、蛋白质纯化及检测中表现突出。以下是对其的详细介绍:

一、化学结构与特性

  1. 脱硫生物素(Desthiobiotin)

    • 是生物素(Biotin)的硫原子缺失衍生物,保留了生物素与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)结合的核心结构。

    • 与链霉亲和素的结合亲和力略低于生物素(解离常数 ),但具有“软释放"特性,即在温和条件下(如添加游离生物素)可被竞争性置换,便于后续分离和纯化。

  2. NHS Ester(N-羟基琥珀酰亚胺酯)

    • 是一种高效的胺反应基团,能够与含有伯胺(-NH₂)的分子(如蛋白质、核酸的赖氨酸残基或氨基修饰的寡核苷酸)发生特异性反应,形成稳定的酰胺键。

    • 反应条件温和,通常在碱性缓冲液(pH 7-9)中进行,无需催化剂。

二、物理性质

  • 外观:白色至浅黄色固体。

  • 溶解性:可溶于水及极性有机溶剂(如DMSO、DMF、乙腈),便于在各种缓冲体系中使用。

  • 分子量:约311.3 g/mol。

三、反应活性与应用

  1. 生物分子标记

    • 通过NHS Ester与蛋白质或核酸的伯胺基团反应,将脱硫生物素共价连接到目标分子上,实现特异性标记。

    • 标记后的分子可通过链霉亲和素修饰的磁珠、荧光探针或固相载体进行捕获、检测或成像,广泛应用于ELISA、Western Blot、免疫沉淀及流式细胞术。

  2. 蛋白质纯化与检测

    • 作为亲和标签,脱硫生物素标记的蛋白质可通过链霉亲和素亲和柱进行纯化。

    • 其“软释放"特性允许在温和条件下洗脱目标蛋白,减少对蛋白活性的影响,并避免与内源性生物素化分子的共洗脱。

  3. 细胞标记与成像

    • 由于脱硫生物素分子较小且不带电荷,NHS-Desthiobiotin可穿透细胞膜,用于活细胞内蛋白质的标记和追踪。

    • 结合链霉亲和素修饰的荧光探针,实现细胞内目标分子的可视化。

  4. 纳米材料功能化

    • 通过NHS Ester与纳米颗粒或聚合物表面的胺基反应,将脱硫生物素修饰到纳米材料上。

    • 结合链霉亲和素桥接,实现靶向捕获、信号放大或可控药物递送,在靶向诊断、分子传感和智能药物载体构建中具有显著优势。

四、特点

  • 高亲和力与特异性:脱硫生物素与链霉亲和素的结合具有高选择性和特异性,确保标记的准确性。

  • 温和洗脱条件:其“软释放"特性允许在温和条件下洗脱目标分子,保护蛋白活性并减少背景干扰。

  • 化学活性可控:NHS Ester的高效胺反应性使标记过程快速、可控,适用于复杂生物体系。

  • 多功能性:广泛应用于蛋白质标记、分子捕获、活细胞成像、纳米材料功能化和生物传感器开发,为高精度、高效率的分子偶联和生物化学研究提供可靠工具。

五、储存与操作注意事项

  • 储存条件

    • -20℃,一年。

  • 操作规范

    • 佩戴手套和护目镜,避免直接接触皮肤或眼睛。

    • 操作和储存应低温、避光,并避免强还原剂或酸性条件。

    • 废弃物处理需遵循实验室安全规范。


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