Desthiobiotin-PEG3-Alkyne,脱硫生物素-三聚乙二醇-炔基的相关描述
2025-11-15
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基本信息
中文名称: 脱硫生物素-三聚乙二醇-炔基
英文名称: Desthiobiotin-PEG3-Alkyne
英文同义词: Desthiobiotin-PEG3-Alk
分子式:C19H33N3O5
分子量:383.49
存储温度:-20℃
纯度:95%
结构式:
核心功能与应用
生物分子标记与检测
通过炔基与叠氮修饰的蛋白、核酸或抗体反应,实现目标分子的特异性标记。
脱硫生物素部分可进一步与链霉亲和素结合,用于亲和纯化或荧光检测(如结合荧光染料标记的链霉亲和素)。
可逆亲和纯化
标记后的复合物可通过游离生物素竞争洗脱,避免传统生物素-链霉亲和素系统所需的强变性条件(如高温或高盐),从而保护样品活性。
适用于动态研究(如细胞表面受体内吞)或脆弱蛋白的分离。
活细胞成像与动态追踪
SPAAC反应无需金属催化剂,毒性低,适合活细胞内代谢标记或实时追踪分子动态。
例如,标记细胞表面糖蛋白以研究其内吞途径。
蛋白质组学与药物开发
在蛋白质相互作用分析中,通过可逆标记减少非特异性结合,提高数据准确性。
用于靶向药物递送系统的开发,如生物素化纳米颗粒的定向修饰。
实验操作要点
溶解与储存
通常溶于DMSO或水(需超声助溶),建议分装后于-20℃避光保存,避免反复冻融导致降解。
工作浓度一般为1–10 mM(DMSO储备液),需根据实验体系优化。
点击化学反应条件
CuAAC反应:需添加铜催化剂(如CuSO₄)、还原剂(如抗坏血酸钠)及配体(如TBTA)以提高效率,但可能对细胞有毒。
SPAAC反应:无需金属催化剂,使用DBCO-叠氮化物更温和,适合活细胞标记。
洗脱与检测
亲和纯化时,用含游离生物素(如1–5 mM)的缓冲液竞争洗脱,避免使用SDS或高温。
检测可通过荧光、质谱或Western blot实现,需根据标记物类型选择合适方法。
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