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cas:1628029-01-5,UV-Tracer Biotin NHS Ester的相关描述

2025-11-20 [25]

UV-Tracer Biotin NHS Ester 是一种结合了生物素(Biotin)、N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS Ester)活性基团和紫外追踪基团(UV-tracer)的化学探针,主要用于生物分子的标记与追踪。

一、结构与化学性质

  • 结构组成:UV-Tracer Biotin NHS Ester由生物素分子、NHS酯活性基团和紫外追踪基团三部分组成。生物素部分可与链霉亲和素或亲和素特异性结合,实现信号放大;NHS酯活性基团可与含伯胺基的分子(如蛋白质、抗体等)发生共价结合,形成稳定的酰胺键;紫外追踪基团则赋予其紫外吸收特性,便于在标记过程中进行追踪与检测。

  • 分子式与分子量:其分子式为C52H76N6O17S,分子量为1089.25。

  • 物理性质:该化合物通常为淡黄色或白色固体,密度预测值为1.30±0.1 g/cm³,pKa预测值为13.90±0.40。

  • 溶解性:可溶于DMSO、DMF等有机溶剂,有助于在实验中的溶解与稀释。

结构式:
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二、应用领域

  • 蛋白质标记与追踪:UV-Tracer Biotin NHS Ester可与蛋白质中的赖氨酸残基或N端氨基发生反应,形成生物素化的蛋白质。这种标记方法不仅保留了蛋白质的生物活性,还通过生物素-链霉亲和素系统实现了信号的放大,提高了检测的灵敏度。同时,紫外追踪基团的存在使得标记过程可被实时追踪与检测,便于实验操作与结果分析。

  • 免疫分析:在ELISA、Western Blot等免疫分析中,UV-Tracer Biotin NHS Ester标记的抗体或抗原可与链霉亲和素或亲和素包被的固相载体结合,形成稳定的复合物。通过紫外检测或化学发光检测,可实现对目标分子的定量或定性分析。

  • 亲和纯化:利用生物素-链霉亲和素系统的高亲和力,UV-Tracer Biotin NHS Ester标记的分子可被亲和柱特异性吸附,从而实现目标分子的纯化与分离。

  • 细胞成像与追踪:在细胞成像实验中,UV-Tracer Biotin NHS Ester标记的荧光探针或抗体可特异性地结合到目标细胞或细胞器上,通过荧光显微镜或共聚焦显微镜观察细胞内的动态变化。紫外追踪基团的存在则有助于在标记过程中实时追踪探针的分布与定位。

三、使用注意事项

  • 反应条件:标记反应通常在pH 8-9的缓冲液中进行,此时NHS酯活性基团具有较高的反应活性。同时,可加入少量有机溶剂(如DMSO)以促进化合物的溶解与反应。

  • 反应时间与温度:反应时间与温度需根据具体实验条件进行优化。一般来说,反应时间过长或温度过高可能导致非特异性结合或蛋白质变性等问题。

  • 储存条件:UV-Tracer Biotin NHS Ester应储存于-20℃以下,避免光照与潮湿环境,以保持其化学稳定性与活性。

  • 安全性:在使用过程中需佩戴适当的防护装备(如手套、护目镜等),避免直接接触皮肤与眼睛。同时,废弃物需按照实验室安全规范进行处理。

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