cas：3520-43-2，JC-1(线粒体膜电位探针)的特点

一、基本信息

JC-1，全称5,5′,6,6′-四氯-1,1′,3,3′-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物，英文名为5,5′,6,6′-Tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide，别名CBIC2(3)。CAS号3520-43-2，分子式C₂₅H₂₇Cl₄IN₄，分子量652.23。外观为红褐色至红棕色固体粉末，纯度通常≥95%（HPLC验证）。易溶于DMSO（浓度可达10 mg/mL），不溶于水。存储条件为-20°C以下、避光、干燥、密封保存，建议充惰性气体（氮气或氩气）保护，避免反复冻融。

二、主要应用

细胞凋亡研究： 这是JC-1最核心的应用。通过红绿比值的变化，可以在凋亡发生的最早期（线粒体膜电位下降阶段）即检测到信号，比Annexin V/PI双染法早数小时，比TUNEL法更早。广泛用于药物诱导凋亡、辐射损伤、氧化应激等模型中。

线粒体功能研究： 监测线粒体膜电位在不同生理或病理条件下的动态变化，如缺氧/复氧、钙超载、代谢应激等。

药物筛选与评价： 评估候选药物对线粒体功能的影响，判断药物是否具有线粒体毒性，是药物安全性评价的常规手段之一。

神经退行性疾病研究： 在阿尔茨海默病、帕金森病、ALS等疾病模型中，线粒体功能障碍是核心病理特征之一，JC-1可用于评估线粒体损伤程度。

干细胞研究： 监测干细胞分化过程中线粒体膜电位的动态变化，评估干细胞的质量和分化状态。

三、存储与实验注意事项

存储条件： -20°C以下、避光、干燥、密封保存，建议充惰性气体保护。

溶解方式： 用无水DMSO配制成储存液（通常5-10 mM），-20°C避光保存。使用前用生理缓冲液（如PBS、HBSS或无血清培养基）稀释至工作浓度（通常2-10 μM）。

工作浓度： 一般为2-10 μM，具体需根据细胞类型和实验目的预实验优化。浓度过高（>20 μM）可能产生非特异性染色或毒性；浓度过低（<1 μM）信号太弱。

DMSO终浓度： 反应体系中DMSO浓度不应超过0.1%-0.2%（即终浓度≤2 μL/mL），否则可能影响细胞活性。

染色时间： 一般30-45分钟，37°C孵育。染色时间过长可能导致探针重新分布，影响比值准确性。

洗涤步骤： 染色后需用预热的PBS或缓冲液洗涤2-3次，去除未结合的JC-1单体，降低背景绿色荧光。

避免光漂白： 全程避光操作，染色后尽快检测，不要长时间暴露在激发光下。

缓冲液选择： 避免使用含伯胺的缓冲液（如Tris、甘氨酸），它们会与JC-1竞争反应。推荐使用PBS、HBSS或HEPES缓冲液（pH 7.2-7.4）。

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