异牡荆素靶点垂钓Pull-down 试剂生物素-异牡荆素Biotin-Isovitexin的应用

生物素-异牡荆素（Biotin-Isovitexin）‌是一款天然黄酮类功能标记型生物素衍生物，核心优势在于同时整合了生物素与链霉亲和素的超高亲和力，以及异牡荆素的天然抗氧化、抗炎、肝保护活性，是黄酮类天然产物靶点鉴定、急性肝损伤机制研究、功能化生物探针开发的核心科研工具。

一、基本结构与核心特性

‌分子组成‌：由生物素母核与异牡荆素（异牡荆黄素，CAS 38953-85-4）的特定羟基位点通过可调控的连接臂共价偶联而成，完整保留两个功能模块的核心活性位点，可按需调整连接臂长度适配不同偶联场景需求 。

‌可定制参数‌：科研级产品纯度≥95%，常规提供mg级标准规格，支持按需定制不同偶联位点的衍生化版本，适配后续生物偶联需求。

‌外观与溶解性‌：室温下为黄色至类白色固态粉末，易溶于DMSO、甲醇等极性有机溶剂，在水中具备中等溶解度，可通过超声辅助溶解。

‌双重功能协同‌：

生物素母核：完整保留与链霉亲和素/亲和素的高特异性、超高亲和力结合能力，结合常数Kd可达10⁻¹⁵ M级别，适配经典生物素-亲和素体系的所有下游应用场景。

异牡荆素模块：完整保留其天然C-苷黄酮的核心药理活性，具备显著的抗氧化、抗炎、肝保护功效，可通过调控m6A修饰通路缓解急性肝损伤，是天然产物研究领域的热门活性黄酮分子 。

二、合成与纯化要点

主流合成工艺‌：以生物素为起始原料，先通过EDC/NHS或CDI活化其羧基位点，再与异牡荆素的特定酚羟基位点在无水弱碱性环境中发生特异性偶联反应，全程严格控制反应温度不超过30℃，避免异牡荆素的黄酮母核结构发生氧化降解。‌

关键工艺控制‌：通过精准调控投料比与反应时间，定向选择异牡荆素的非活性位点羟基进行偶联，保留其母核的生物活性，产物手性构型完整度可达98%以上。

‌后处理纯化‌：反应结束后，通过制备型高效液相色谱（HPLC）进行分离提纯，冷冻干燥得到固体产物，最终通过质谱、¹H NMR交叉验证产物结构与纯度，确保两个功能模块的活性位点完整保留。

三、应用场景

异牡荆素胞内靶蛋白挖掘，Pull-down 靶点垂钓细胞裂解液或活细胞孵育捕获异牡荆素结合蛋白，质谱鉴定新靶点，解析抗炎、抗氧化、抗肿瘤机制。

分子互作体外验证体外重组蛋白孵育，验证异牡荆素与候选靶蛋白的直接相互作用，结合 WB 验证。

细胞内探针定位示踪探针孵育细胞后，链霉亲和素荧光染色，观察异牡荆素在细胞内分布。

黄酮构效关系研究对比不同位点修饰的异牡荆素探针，评估母核羟基、C - 糖基对蛋白结合的影响。

生物素-雷公藤红素

生物素-乳酸

灵芝酸A-生物素

生物素-天冬酰胺

生物素-赖氨酸

生物素-4-氨基丁酸

生物素-2-氨基异丁酸

Glucose-Biotin

生物素-L精氨酸

生物素-D精氨酸

Bufotalin-Biotin

生物素-PBA

卡维地洛-生物素

生物素-琥珀酸

小檗红碱-生物素

生物素-5-甲基尿苷

生物素-BSA

生物素-棕榈酸

VB5-Biotin

维生素B-Biotin