Biotin 标记棕榈酸探针生物素-棕榈酸Biotin-C16的应用

生物素 - 棕榈酸（Biotin-Palmitic acid），也常称为生物素化棕榈酸，是棕榈酸（十六烷酸，C16:0）通过连接臂共价偶联生物素的脂肪酸探针，属于蛋白脂修饰化学探针，主要用来模拟棕榈酸，标记细胞内发生 S - 棕榈酰化（S-palmitoylation）的蛋白，依托生物素 - 链霉亲和素系统实现富集鉴定，是棕榈酰化修饰组学的经典工具分子。

一、分子结构解析

结构式简写：Biotin-Linker-Palmitic acid

脂链母核：棕榈酸，直链饱和 C16 脂肪酸，是细胞内 S - 棕榈酰转移酶（ZDHHC 家族）的天然底物；棕榈酰化通常将棕榈酸共价连接在蛋白半胱氨酸巯基上，调控膜蛋白膜定位、稳定性、蛋白互作。

亲和标签：生物素，用于链霉亲和素磁珠捕获、富集被标记的棕榈酰化蛋白。

连接臂：常用 C2/C4、PEG 短 linker；偶联位点一般在棕榈酸羧基端延伸 linker 接生物素，尽量保留烷基长链的疏水性，保证可被 ZDHHC 酶识别、转运至膜区。

二、合成路线

酰胺缩合

1.选用带氨基 linker 的生物素（Biotin-NH2）；

2.棕榈酸在无水 DMF 中用 HATU/DIEA 活化羧基；

3.和 Biotin-NH2 室温避光酰胺化反应；

4.制备 HPLC 纯化（C18 反相，乙腈 / 水体系）；

5.冻干，HRMS、NMR、HPLC 质控，纯度≥95%；按需做成 NHS 活化酯衍生物。

三、应用方向

棕榈酰化修饰组学：全局鉴定细胞内 S - 棕榈酰化底物蛋白；

ZDHHC 转移酶底物筛选、酶活抑制剂筛选；

膜蛋白脂修饰研究：GPCR、离子通道、小 G 蛋白棕榈酰化功能验证；

脂代谢、脂质转运示踪；

验证蛋白棕榈酰化对膜定位、蛋白相互作用的调控。

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