金球-罗丹明B|罗丹明B标记纳米金颗粒Rhodamine B-AuNP的制备

金球-罗丹明B 是一类表面带有罗丹明B染料的荧光金纳米颗粒。它把金纳米颗粒的 LSPR 光学特性、表面可修饰性和罗丹明B的橙红色荧光结合在一起，适合做多色荧光示踪、细胞摄取追踪、免疫检测读出，也可以用于 FRET/淬灭型传感探针。

一、常见形式

1.罗丹明B直接修饰金球
罗丹明B可通过静电吸附、疏水作用或共价连接附着在金纳米颗粒表面，用于荧光标记或构建传感体系。

2.PEG-罗丹明B 修饰金球
例如 RB-PEG-SH，通过巯基与金表面形成 Au–S 键，既能提供荧光信号，又能提高水相分散稳定性。

3.罗丹明B + 功能化金球
金球表面可同时带 -COOH、-NH₂、生物素、SA、抗体或小分子，用于后续偶联。

二、和 FITC 金球的区别

金球-FITC：绿色通道，Ex/Em 约 490/520 nm，适合与绿色通道配合。

金球-罗丹明B：橙红/红色通道，Ex/Em 约 540–560/570–610 nm，适合放在绿色之后、远红之前。

两者都需要注意金表面对染料的淬灭效应；距离金表面太近时荧光会下降，通常需要通过 PEG、蛋白层或 SiO₂ 壳层拉开距离。

三、制备工艺

先通过经典柠檬酸钠还原法合成粒径均一的球形金纳米颗粒，作为核心基底，表面用柠檬酸根进行初步稳定。

向金纳米颗粒分散液中加入多巴胺单体，在pH 8.5的Tris缓冲液中搅拌，使多巴胺氧化自聚合形成聚多巴胺壳层，壳层厚度可通过反应时间精准调控，2小时反应可得到约5 nm厚的壳层。

在聚合进行2小时后加入罗丹明B，继续孵育4小时，将罗丹明B共价或物理吸附到聚多巴胺层上，既保障高荧光强度，又不破坏胶体稳定性。

最后采用8000 rpm低速短时离心15分钟，去除未结合的游离罗丹明B、多余小分子等杂质，完成纯化分装，避免颗粒发生不可逆聚集。

稀土铕荧光微球2um

羧基微球50nm

PS微球100nm

氨基磁珠1um

50nm PMMA微球

50nm PMMA绿色荧光微球

50nm PS微球

50nm PS绿色荧光微球

8um sa磁珠

聚苯乙烯微球 488激发 绿色300nm

聚苯乙烯微球 488激发 绿色300nm

磺酸基修饰的聚苯乙烯微球 80nm

羧基聚苯乙烯微球粒径100nm，固含量5%

氨基磁珠5um

绿色荧光聚苯乙烯ps微球100nm(颗粒)

红色荧光聚苯乙烯ps微球300nm(颗粒)

500nm聚苯乙烯微球

2.7um聚苯乙烯磁珠

300nm聚苯乙烯磁珠

绿色荧光微球10um非单分散 粉末