金球-Alexa Fluor 488/Alexa Fluor 488 金探针/AuNP-Alexa Fluor 488的应用

金球-Alexa Fluor 488是一类将高性能绿色荧光染料Alexa Fluor 488通过共价键修饰在金纳米颗粒表面的复合功能纳米探针，结合了金纳米颗粒的等离子体特性与Alexa Fluor 488的超高亮度、高稳定性绿色荧光优势，是生物成像、免疫检测、多色同步分析领域应用广泛的通用型功能纳米探针之一。

一、制备工艺

主流采用‌两步共价偶联法‌制备：

先通过经典Frens法，以柠檬酸钠为还原剂还原氯金酸，合成单分散金纳米颗粒，精准调控粒径分布，得到形貌规整的基础金纳米颗粒。

对金纳米颗粒表面进行半胱氨酸或16-巯基十六烷酸改性，利用金-硫键的强相互作用，将带氨基的活性分子修饰到颗粒表面，大幅提升胶体稳定性。

利用Alexa Fluor 488的NHS酯活性基团，与颗粒表面的氨基发生特异性共价反应，将染料稳定锚定在金纳米颗粒表面，避免染料在生物体系中脱落。

经多次超速离心纯化去除未反应游离Alexa Fluor 488染料，最终得到低非特异性吸附的成品探针。

二、性能优势

通用适配性比较强：匹配所有常规荧光设备的488 nm激发通道，无需特殊硬件改造即可直接使用，实验操作门槛极低。

等离子体荧光增强：金纳米颗粒的局域表面等离子体共振效应可精准调控Alexa Fluor 488与颗粒表面的纳米间距，显著增强荧光发射强度，同时大幅降低光漂白速率。

超高亮度与稳定性：Alexa Fluor 488依托金纳米颗粒的保护作用，抗光漂白能力远超游离Alexa Fluor 488染料，支持数小时以上的长时间连续荧光成像观测。

低非特异性吸附：经PEG修饰后，探针在生物样本中杂蛋白非特异性吸附极低，复杂血清基质中检测背景远低于普通未修饰金纳米颗粒。

三、应用场景

‌细胞水平高灵敏度免疫荧光成像‌：作为488 nm通道高亮度荧光探针，用于细胞表面靶标蛋白的特异性标记成像，可清晰观测Her2等肿瘤标志物在SKBR3细胞表面的分布状态，成像信噪比远高于普通游离荧光二抗。

‌多色流式细胞术分析‌：作为绿色通道核心荧光探针，与蓝、橙、红、近红外荧光探针配合，构建5色以上多通道检测体系，实现细胞亚群的多参数同步分群分析。

‌高灵敏度生物传感‌：依托金纳米颗粒的荧光猝灭-恢复效应，构建“开-关"型绿色荧光传感体系，用于核酸、低丰度肿瘤标志物的超灵敏检测，检测限可达pM级别。

‌细胞摄取与亚细胞定位研究‌：进一步修饰寡聚精氨酸肽或富组氨酸肽，可高效促进细胞内吞，同时实现探针从内体、溶酶体中的逃逸，精准追踪探针在细胞内的转运与亚细胞分布。

‌多靶点同步生物成像‌：作为绿色通道示踪探针，与其他不同发射波段的荧光探针配合，在单视野下实现多种不同靶标分子的同步分布定位。

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 50 nm

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 60 nm

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 80 nm

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 100 nm

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 20 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 40 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 60 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 80 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 100 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 120 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 140 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 160 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 180 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 200 nm CTAB

Gold Nanoparticles/金纳米颗粒, 250 nm CTAB

Polystyrene Particles, 17 um-Rhodamine B/聚苯乙烯微球-罗丹明B

Polystyrene Particles, 18 um-Rhodamine B/聚苯乙烯微球-罗丹明B

Polystyrene Particles, 20 um-Rhodamine B/聚苯乙烯微球-罗丹明B

Polystyrene Particles, 22 um-Rhodamine B/聚苯乙烯微球-罗丹明B

Polystyrene Particles, 23 um-Rhodamine B/聚苯乙烯微球-罗丹明B