生物素修饰聚苯乙烯橙色荧光微球/Biotin-PS橙色荧光微球的应用

生物素修饰聚苯乙烯橙色荧光微球（Biotin-PS Orange），以交联聚苯乙烯（PS）为骨架，表面共价接枝生物素，内嵌橙色荧光染料，属于沉降型功能荧光颗粒。

一、基础物性参数：

• 基质：交联聚苯乙烯 PS

• 密度：约 1.05 g/cm³，PBS 中沉降

• 折射率：1.59

• 粒径区间：50 nm ~ 100 μm；常用规格：200 nm、500 nm、1 μm、2 μm、5 μm、10 μm

• 荧光参数：内嵌橙色荧光染料，Ex 540–560 nm，Em ~585 nm；光谱落在绿光与红光之间，多色上机时必须做好光谱补偿，降低与 TRITC 红光通道的信号串扰

• 表面基团：共价接枝生物素（Biotin），生物素载量可定制

• 分散介质：纯水 /pH7.2 PBS 悬浮液；干粉、水悬液两种形态可选；可定制无菌无叠氮钠版本

• 溶剂耐受：交联 PS 耐受醇类、二氯甲烷、甲苯等弱 / 中极性有机溶剂；强芳香溶剂长时间浸泡仍存在溶胀风险，建议提前预实验验证

二、亲和反应原理

依托经典生物素 - 链霉亲和素超高亲和体系（Kd ~10⁻¹⁵ M）：

1. 无需 EDC/NHS 活化微球，pH 6.5–8.0 中性 PBS 室温孵育，特异性捕获链霉亲和素 SA、SA 标记抗体、SA 标记荧光探针；

2. 选型区分：SA 修饰荧光微球 = 携带 SA，抓取生物素化配体（正向亲和）；Biotin 修饰荧光微球 = 携带 Biotin，抓取 SA 类探针（反向亲和），二者经常配对作为对照；

3. 孵育过程中加入 BSA 封闭空白位点，有效降低非特异性吸附背景；体系严禁引入游离生物素，游离 Biotin 会竞争性抢占 SA 结合位点。

三、主要应用方向

1. 链霉亲和素探针捕获、亲和桥接体系构建、荧光免疫、液相芯片检测；

2. 有机相条件下固相衍生、标记反应（PMMA 微球无法适配）；

3. 共聚焦多通道成像、流式多色编码，搭配蓝、绿、红荧光微球实现四靶标同步标记；

4. 蛋白亲和相互作用、结合动力学、生物传感器开发；

5. 对照实验：搭配 Biotin-PMMA Orange 对比 PS/PMMA 基质吸附、溶剂耐受差异；搭配 SA-PS Orange 做正向 / 反向亲和对照。

50nm绿色荧光微球

100nm绿色荧光微球

200nm绿色荧光微球

羧基绿色荧光磁性微球 3um-5um

羧基红色荧光磁性微球 3um-5um

50nm羧基稀土铕荧光微球

100nm羧基稀土铕荧光微球

200nm羧基稀土铕荧光微球

聚苯乙烯微球 488激发 绿色300nm

链霉亲和素磁珠100nm

稀土铕羧基荧光微球100nm

sa磁珠8um

羧基红色胶乳微球300nm

羧基红色胶乳微球400nm

绿色羧基荧光微球400nm激发365nm，发射515nm

聚苯乙烯荧光微球，粒径1um，532nm激发 620nm发射

生物素磁珠2.7～3um