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如何确定荧光染料的激发波长/发射波长?

2023-05-25 [153]

如何确定荧光染料的激发波长/发射波长?

荧光光谱分为:激发光谱(PLE)和发射光谱(PL)。

激发光谱:固定发射光的波长,改变激发光的波长,记录荧光强度随激发波长的变化。发射光谱:固定激发光的波长,记录不同发射波长处荧光强度随发射波长的变化。

无论是激发还是发射荧光光谱图,其都是记录发射荧光强度随波长的变化。所以荧光光谱中纵坐标为强度,横坐标为波长。首先从图中能获取峰位和半峰宽。峰位的直观体现是荧光的颜色;半峰宽则表示荧光的纯度。

因此可以根据这种荧光素的激发谱线来确定其激发波长,根据其发射谱来确定其发射波长。

激发谱:不同波长的光激发荧光素后,荧光强度的变化。

发射谱:同一波长的光激发荧光素后,各波长下的荧光强度的变化。

一般都取峰值。

其发射波长会随激发波长变吗?

对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建,对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。 但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的偏移往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。


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