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雌二醇-鸡卵清白蛋白偶联物在免疫分析检测中有哪些应用?

2024-09-11 [96]

雌二醇-鸡卵清白蛋白偶联物|Estradiol-Ovalbumin Conjugate(Estradiol-OVA Conjugate)

雌二醇 - 鸡卵清白蛋白偶联物在免疫分析检测中有以下重要应用:

 

一、酶联免疫吸附测定(ELISA

竞争法 ELISA:将偶联物包被在酶标板上,加入待测样品和一定量的抗雌二醇抗体。样品中的雌二醇与偶联物竞争结合抗体。经过孵育和洗涤后,加入酶标记的二抗,通过酶催化底物显色。根据显色强度与标准曲线对比,可以确定样品中雌二醇的含量。这种方法适用于检测低浓度的雌二醇。

间接法 ELISA:先将偶联物包被在酶标板上,加入待测样品,若样品中含有雌二醇抗体,会与偶联物结合。洗涤后加入酶标记的抗抗体,再次孵育和洗涤后,加入底物显色。显色强度反映了样品中雌二醇抗体的水平,间接推断出雌二醇的存在情况。

 

二、免疫层析法

胶体金免疫层析:将抗雌二醇抗体标记在胶体金颗粒上,偶联物固定在硝酸纤维素膜的检测线上。当含有雌二醇的样品滴加到试纸条上时,样品在毛细作用下向前移动。如果样品中存在雌二醇,会与胶体金标记的抗体结合,形成复合物。该复合物继续移动,与检测线上的偶联物竞争结合抗体。根据检测线的显色情况,可以快速判断样品中雌二醇的有无或含量范围。

荧光免疫层析:采用荧光标记的抗体和偶联物进行检测。样品中的雌二醇与荧光标记的抗体结合后,在层析过程中与检测线上的偶联物相互作用。通过检测荧光强度,可以定量分析样品中雌二醇的含量。这种方法具有更高的灵敏度和准确性。

 

三、化学发光免疫分析

以偶联物作为标准品或校准品:在化学发光免疫分析系统中,使用雌二醇 - 鸡卵清白蛋白偶联物制备标准曲线。将已知浓度的偶联物与抗雌二醇抗体和发光标记物反应,通过测量发光强度与偶联物浓度的关系,建立标准曲线。然后将待测样品与抗体和发光标记物反应,根据发光强度在标准曲线上确定雌二醇的含量。

 

四、免疫传感器

基于抗体的免疫传感器:将抗雌二醇抗体固定在传感器表面,当含有雌二醇的样品流过传感器时,雌二醇与抗体结合。然后加入偶联物作为竞争试剂,与样品中的雌二醇竞争结合抗体。通过测量传感器的信号变化,可以定量检测雌二醇的含量。这种免疫传感器具有快速、灵敏、实时检测的优点。

基于适体的免疫传感器:适体是一种具有高亲和力和特异性的核酸或肽分子,可以替代抗体用于免疫传感器。将适体固定在传感器表面,与雌二醇结合后,加入偶联物进行竞争反应。通过检测传感器的信号变化,可以实现对雌二醇的检测。适体免疫传感器具有稳定性好、易于合成和修饰等优点。

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