叶酸-辣根过氧化物酶标记物在免疫检测中的应用原理是什么?


叶酸-辣根过氧化物酶标记物|Folic Acid-Peroxidase Conjugate(FA-HRP)
叶酸 - 辣根过氧化物酶标记物在免疫检测中的应用原理主要基于抗原 - 抗体的特异性结合以及辣根过氧化物酶的催化特性,具体如下:
1.抗原 - 抗体特异性结合:
叶酸的靶向性:叶酸对某些细胞表面或生物分子上的叶酸受体具有高度的特异性亲和力。在免疫检测的体系中,待检测的样本中如果存在含有叶酸受体的目标物质(如特定的细胞、蛋白质等),叶酸部分能够与这些目标物质上的叶酸受体特异性地结合。这种特异性结合就像是一把 “钥匙" 和 “锁" 的关系,确保了标记物能够准确地识别并结合到目标上,为后续的检测提供了基础。
抗体的识别作用:在免疫检测中,通常还会使用针对目标物质的特异性抗体(一抗)。如果目标物质是一种蛋白质抗原,一抗能够与该抗原特异性结合。当叶酸 - 辣根过氧化物酶标记物中的叶酸与目标物质结合后,抗体也会与目标物质上的相应抗原表位结合,进一步增强了标记物与目标物质的结合特异性和稳定性。这样就形成了叶酸 - 目标物质 - 抗体的复合物。
2.辣根过氧化物酶的催化反应:
酶促反应的启动:辣根过氧化物酶能够催化特定的底物发生化学反应。当叶酸 - 辣根过氧化物酶标记物与目标物质结合后,加入辣根过氧化物酶的底物。在有过氧化氢存在的条件下,辣根过氧化物酶会催化底物发生氧化反应。
信号的产生与检测:底物被辣根过氧化物酶催化氧化后,会产生颜色变化、发光等可检测的信号。例如,常用的底物四甲基联苯胺(TMB)在被辣根过氧化物酶催化后会由无色变为蓝色,加入酸终止反应后又变为黄色。通过检测这种信号的强度,可以间接反映出样本中目标物质的存在量。信号越强,说明样本中目标物质的含量越高,从而实现对目标物质的定性或定量检测。
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