NBD-胆固醇的荧光量子产率受哪些因素影响？

分子结构因素

• 共轭体系：NBD - 胆固醇中的 NBD 基团具有一定的共轭结构，共轭体系的大小和完整性对荧光量子产率至关重要。一般来说，增加共轭体系的程度，如增加共轭双键的数量或延长共轭链，可使荧光效率增大。

• 取代基效应：NBD - 胆固醇分子中的取代基会影响荧光量子产率。给电子取代基如 - OH、-NH₂、-OR、-NR₂等能增强荧光，这是由于产生了 p-π 共轭作用，增强了 π 电子的共轭程度，导致荧光增强；而吸电子取代基如 - NO₂、-COOH、-C=O、卤素离子等使荧光减弱。

• 刚性平面结构：荧光效率高的物质，其分子多是平面构型，且具有一定的刚性。NBD - 胆固醇分子中若存在部分结构的柔性增加，可能会导致分子内振动和转动增加，从而使非辐射跃迁的几率增大，荧光量子产率降低。

环境因素

• 溶剂效应：溶剂的极性对 NBD - 胆固醇的荧光量子产率有显著影响。一般地讲，许多共轭芳香族化合物的荧光强度随溶剂极性的增加而增强，且发射峰向长波方向移动。在不同的溶剂中，NBD - 胆固醇的荧光发射波长和强度可能会有所不同，从而影响其荧光量子产率。

• 温度：通常，随着温度的降低，荧光物质溶液的荧光量子产率和荧光强度将增大。因为温度降低时，分子的热运动减弱，减少了分子间的碰撞和能量转移，从而降低了非辐射跃迁的几率，使荧光量子产率提高。

• pH 值：假如 NBD - 胆固醇所处的溶液环境 pH 值改变，可能会影响其荧光基团的电荷状态，进而影响荧光量子产率。特别是当 NBD - 胆固醇分子中存在酸性或碱性基团时，溶液的 pH 值对其荧光光谱和荧光强度的影响会更加明显。

• 浓度：当 NBD - 胆固醇的浓度过高时，可能会发生荧光自猝灭现象，即荧光分子之间相互作用导致荧光强度降低，从而使荧光量子产率下降。而浓度过低时，荧光信号可能较弱，难以准确检测和测定荧光量子产率。

其他因素

• 标记反应条件：在 NBD - 胆固醇的合成或标记过程中，反应条件如反应温度、反应时间、反应物比例等可能会影响 NBD 基团与胆固醇的结合方式和程度，进而影响荧光量子产率。

• 光稳定性：长时间暴露在强光下，尤其是紫外线和可见光区域的光，可能会导致 NBD - 胆固醇的荧光猝灭，降低荧光量子产率。因此，在保存和使用 NBD - 胆固醇时，应尽量避免光照。

• 与其他物质的相互作用：NBD - 胆固醇与细胞内的其他生物分子如蛋白质、脂质等可能会发生相互作用，这些相互作用可能会改变 NBD - 胆固醇的微环境，从而影响其荧光量子产率。

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