FITC-肝素的荧光强度受哪些因素影响？

环境因素

• 温度：一般来说，溶液温度降低时，介质的粘度增大，FITC - 肝素与分子的碰撞减少，去活化过程也减少，荧光强度会增加；反之，温度上升，碰撞频率增加，使去活化几率增加，荧光强度则下降。

• pH 值：FITC 在酸性溶液中荧光强度显著降低，而在 pH 7-12 的范围内相对稳定。对于 FITC - 肝素，当溶液 pH 值不适宜时，可能影响 FITC 部分的荧光特性，也可能改变肝素的结构和电荷分布，进而影响二者的结合状态，导致荧光强度改变。

• 溶剂：不同的溶剂对 FITC - 肝素的荧光强度有影响。一般而言，增加溶剂的极性有利于荧光的测定，但如果溶剂中存在荧光杂质，则可能会干扰测定结果，使荧光强度的测量不准确。

浓度因素

• FITC - 肝素自身浓度：当 FITC - 肝素的浓度过高时，会发生自熄灭现象，导致荧光强度不再与浓度成正比增加，反而可能降低。这是因为高浓度下，荧光分子之间的相互作用增强，如碰撞猝灭、能量转移等，使得荧光发射效率降低。

• 其他物质的浓度：如果体系中存在其他能够与 FITC - 肝素发生相互作用的物质，且其浓度发生变化，也会影响 FITC - 肝素的荧光强度。例如，当存在某些金属离子或蛋白质时，可能与 FITC - 肝素结合或发生反应，从而改变其荧光特性。

时间因素

• 光照时间：FITC - 肝素经长时间紫外线照射及空气的氧化作用，会使荧光逐渐减退。因此，在实验过程中，应尽量减少样品暴露在光照下的时间，以保证荧光强度的稳定性。

• 反应时间：在 FITC 与肝素的标记反应过程中，反应时间不足可能导致标记不全，影响荧光强度；而反应时间过长，可能会引起 FITC 或肝素的结构变化，也会对荧光强度产生不利影响。

其他因素

• 荧光猝灭剂：如果体系中存在荧光猝灭剂，如某些具有氧化还原性质的物质、重金属离子等，它们可能与 FITC - 肝素发生相互作用，导致荧光猝灭，使荧光强度降低。

• 分子结构变化：在长期储存或特定的实验条件下，FITC - 肝素的分子结构可能发生变化，如肝素的降解、FITC 与肝素之间的键断裂等，这都会导致荧光强度的改变。

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