反应原理
FITC - 恩替诺特的制备主要基于 FITC（异硫氰酸荧光素）与恩替诺特之间的化学反应。FITC 分子中的异硫氰酸酯基团（-N = C = S）具有较高的反应活性，它能够与恩替诺特分子上的伯氨基（-NH₂）发生亲核加成反应，形成稳定的硫脲键。这个反应是制备 FITC - 恩替诺特的关键化学过程。
具体步骤
原料准备
首先需要准备高纯度的 FITC 和恩替诺特。FITC 通常可以从商业渠道购买，其纯度一般要求在 90% 以上。恩替诺特也需要是经过质量检验的药品级或试剂级化合物。同时，还需要准备合适的反应溶剂，如二甲基亚砜（DMSO）或 N,N - 二甲基甲酰胺（DMF）。这些溶剂可以溶解恩替诺特和 FITC，并且能够提供一个相对稳定的反应环境。
反应条件设置
将恩替诺特溶解在适量的反应溶剂中，通常恩替诺特的浓度可以控制在 0.1 - 1mol/L 之间。然后在低温（一般为 0 - 4℃）和搅拌的条件下，缓慢加入 FITC 溶液。FITC 与恩替诺特的摩尔比可以根据实际需要进行调整，一般在 1:1 - 1.2:1 之间。反应过程中，需要严格控制反应温度和 pH 值。pH 值通常维持在 7 - 9 之间，可以使用缓冲溶液（如磷酸盐缓冲液）来实现。
反应过程监测
在反应过程中，可以通过薄层色谱法（TLC）来监测反应的进度。使用硅胶板作为固定相，选择合适的展开剂（如氯仿 - 甲醇混合液），将反应液点样在硅胶板上，观察斑点的移动情况。当反应全时，代表恩替诺特的斑点会逐渐消失，而代表 FITC - 恩替诺特的新斑点会出现并保持稳定。反应时间根据反应规模和具体条件不同，一般可能需要 2 - 24 小时。
产物分离与纯化
反应结束后，需要对产物进行分离和纯化。首先可以通过减压蒸馏除去反应溶剂，得到粗产物。然后可以使用柱色谱法进行纯化，选择合适的固定相（如硅胶柱）和流动相（如乙酸乙酯 - 石油醚混合液），根据产物和杂质在固定相和流动相之间的分配系数不同，将产物分离出来。还可以使用高效液相色谱法（HPLC）进行进一步的精制，通过优化色谱条件（如选择合适的色谱柱、流动相组成和流速等），得到高纯度的 FITC - 恩替诺特。
质量控制
纯度检测
可以使用高效液相色谱法（HPLC）来检测 FITC - 恩替诺特的纯度。通过与标准品对比，根据色谱峰的面积和保留时间来判断产物的纯度。一般要求产物的纯度在 95% 以上。
荧光性能检测
由于 FITC - 恩替诺特是一种荧光标记化合物，需要检测其荧光性能。可以使用荧光分光光度计来测量其激发波长和发射波长。FITC 的典型激发波长在 490 - 495nm 之间，发射波长在 520 - 530nm 之间。同时，还需要检测荧光强度，确保标记后的化合物具有足够的荧光信号强度，以便于后续的实验应用。
关于我们:
陕西星贝爱科生物科技经营的产品种类包括有：合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记物、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二氧化硅，聚合物微球，近红外荧光染料，聚苯乙烯微球，上转换纳米发光颗粒，MRI核磁造影产品，荧光蛋白及荧光探针等等。
温馨提示：供应产品仅用于科研，不能用于人体！
相关产品：
Cy5.5-5-羟基色胺盐酸盐
cy5标记3-吲哚丙酸,CY5-3-Indolepropionic acid
FITC-D-丙氨酸 FITC-D-Alanine
FITC-辣椒素,FITC-Nonivamide
FITC-Dox,FITC-阿霉素
Cy2-蔗糖,CY2-Sucrose
Cy2-半乳糖,CY2-Galactose
Cy2-琼脂糖CY2-Agarose
FITC-脯氨酸，FITC-L-Proline
2025-01-09
[84]
