吐毒素-鸡卵清白蛋白偶联物的制备方法有哪些


吐毒素-鸡卵清白蛋白偶联物的制备方法主要有以下几种:
化学交联法
活泼酯法:将吐毒素(DON)与载体蛋白鸡卵清白蛋白(OVA)分别溶解在适当的溶剂中,然后通过化学交联技术将它们连接起来。这种交联过程需要精确控制反应条件,如温度、pH值和反应时间等。
碳二亚胺法:利用碳二亚胺类试剂作为交联剂,在一定的反应条件下,使吐毒素和鸡卵清白蛋白发生交联反应,形成偶联物。
纳米乳包裹法
纳米乳的制备:称取适量的油相(如角鲨烯和司盘85)混合均匀,再称取吐温80溶解于注射用水中,涡旋下加入油相中得到初乳,然后进行高压均质处理,定容后得到纳米乳。
抗原的包载:取制备好的纳米乳与吐毒素-鸡卵清白蛋白偶联物混匀,在一定温度下摇床孵育一段时间,使偶联物被包载于纳米乳中。
修饰与优化:为了提高纳米乳的稳定性和生物利用度,还可以在纳米乳表面包裹一层生物黏附性材料,如壳聚糖等。
其他方法
基因工程法:通过基因工程技术,将吐毒素的基因与鸡卵清白蛋白的基因进行融合表达,从而得到吐毒素-鸡卵清白蛋白偶联物。
自组装法:利用吐毒素和鸡卵清白蛋白的自组装特性,在一定的条件下,使它们自发地形成偶联物。
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