6’-Sialyllactose的制备方法有哪些

6’-Sialyllactose（6'-唾液酸乳糖）的制备方法主要包括化学合成法和生物合成法（酶催化反应与微生物发酵），以下是具体介绍：

化学合成法

• 原理：以唾液酸和乳糖为起始原料，在特定的反应条件下通过糖苷键的形成反应合成6’-Sialyllactose。

• 过程：通常涉及保护基策略，以逐步构建糖苷键。这种方法需要高纯度的唾液酸和乳糖原料，且反应条件较为苛刻，可能涉及强酸、强碱等条件，但收率可能较低且难以实现工业化生产。

生物合成法

1. 酶催化反应

• 原理：利用特定的糖基转移酶（如α2,6-唾液酸转移酶）将唾液酸转移到乳糖上，形成6’-Sialyllactose。

• 过程：通过基因工程技术将编码糖基转移酶的基因导入宿主细胞（如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等），使宿主细胞能够表达并分泌这些酶。然后，在含有乳糖和唾液酸的培养基中培养这些宿主细胞，通过酶催化反应合成6’-Sialyllactose。

2. 微生物发酵

• 原理：通过基因工程技术构建能够从头合成6’-Sialyllactose的微生物细胞工厂。

• 过程：例如，有研究通过改造枯草芽孢杆菌，引入来源于脑膜炎奈瑟菌的NeuC、NeuB、NeuA以及来源于发光杆菌属希帕菌JT-ISH-224的α2,6-唾液酸转移酶，成功构建了6’-Sialyllactose的从头合成途径。通过微调启动子强度、敲除竞争抑制途径基因以及对前体合成基因拷贝数进行优化，进一步提高了6’-Sialyllactose的产量。

  
  

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