NHS-5(6)Carboxyrhodamine的用途
2025-11-12
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NHS-5(6)Carboxyrhodamine(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,TAMRA-SE)是一种重要的荧光标记试剂,在生物化学和分子生物学领域具有广泛的应用,具体用途如下:
1. 蛋白质标记与免疫检测
蛋白质标记:NHS-5(6)Carboxyrhodamine可通过其NHS酯基团与蛋白质、抗体、肽等生物分子中的氨基(-NH₂)发生共价偶联反应,形成稳定的酰胺键。这种标记方式适用于多种蛋白质,如酶、抗体等,便于后续的荧光检测和分析。
免疫分析:在免疫分析中,NHS-5(6)Carboxyrhodamine标记的抗体可用于Western Blot、免疫荧光染色等技术,用于分析和定量目标蛋白。其强荧光信号和良好的光稳定性使得检测结果更加准确可靠。
酶联免疫吸附试验(ELISA):NHS-5(6)Carboxyrhodamine可偶联到抗体上,通过荧光信号进行定量分析,提供比传统颜色基质更高的灵敏度。
2. 核酸标记与检测
寡核苷酸标记:NHS-5(6)Carboxyrhodamine可用于标记寡核苷酸、DNA/RNA探针,适用于荧光原位杂交(FISH)、自动DNA测序等实验。其荧光特性使得核酸分子在检测中更加容易被追踪和定位。
DNA/蛋白质标记与细胞染色:由于NHS-5(6)Carboxyrhodamine稳定的荧光特性和对pH的不敏感性,它也适用于DNA/蛋白质的标记和细胞染色,有助于研究核酸与蛋白质的相互作用。
3. 细胞成像与追踪
细胞内靶蛋白标记:NHS-5(6)Carboxyrhodamine可标记细胞内靶蛋白,实现高对比度荧光成像。其橙红色荧光可避开生物组织自发荧光干扰,提高成像的清晰度。
细胞追踪与定位:通过将NHS-5(6)Carboxyrhodamine偶联到细胞表面分子或抗体上,研究人员可以定量分析细胞群体的免疫表型和分子表达,追踪细胞在体内的分布、迁移和相互作用。
活体成像:结合近红外染料,NHS-5(6)Carboxyrhodamine还可用于动物活体深层组织成像,为生物医学研究提供有力工具。
4. 分子相互作用研究
荧光共振能量转移(FRET):NHS-5(6)Carboxyrhodamine可作为FRET技术中的受体染料,与FAM等供体染料配对,研究分子间相互作用。这种技术在蛋白质构象变化、DNA杂交等领域具有广泛应用。
金属离子与酶活性检测:通过连接酶底物或离子螯合剂(如BAPTA),NHS-5(6)Carboxyrhodamine可构建荧光探针,检测金属离子(Ca²⁺、Mg²⁺)或酶活性变化。
5. 多肽标记与功能研究
多肽标记:NHS-5(6)Carboxyrhodamine可用于标记合成多肽,研究其结构与功能。这种标记方式有助于揭示多肽在生物体内的作用机制和信号传导途径。
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