请描述链霉亲和素修饰PE微球的制备过程。
2025-11-21
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链霉亲和素修饰PE微球的制备过程主要包含PE微球表面活化、链霉亲和素共价结合、纯化精制三个核心步骤,具体介绍如下:
一、PE微球表面活化
合成纯净PE微球:通过化学方法(如乳液聚合、悬浮聚合)制备纯净的聚乙烯(PE)微球,确保微球表面光滑、粒径均一。
引入活性基团:采用氧化、硅烷偶联等方法对PE微球表面进行化学修饰,引入羧基(-COOH)、氨基(-NH₂)等活性基团。这些基团为后续链霉亲和素的共价结合提供反应位点。
二、链霉亲和素共价结合
根据微球表面修饰的活性基团类型,选择合适的交联剂实现链霉亲和素的共价结合:
羧基活化法:若微球表面为羧基,使用EDC/NHS交联剂活化羧基,使其与链霉亲和素分子上的氨基形成稳定的酰胺键。
氨基交联法:若微球表面为氨基,则可通过戊二醛等交联剂与链霉亲和素的氨基进行交联反应,形成共价键。
三、纯化精制
去除未结合物质:反应结束后,通过离心、洗涤等步骤去除未结合的链霉亲和素及交联剂等试剂,确保产品纯度。
保存与稳定性:将纯化后的链霉亲和素修饰PE微球冻干或悬浮于缓冲液中保存,以保持其结合活性和稳定性。
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