首页 > 新闻资讯 > NHS修饰96孔板的制备方法有哪些

NHS修饰96孔板的制备方法有哪些

2026-01-02 [4]

NHS修饰96孔板的制备方法主要包括以下步骤,这些步骤基于共价结合原理,通过NHS与碳二亚胺(如EDC)联用,活化孔板表面的羧基,进而与目标分子中的氨基发生反应,形成稳定的酰胺键:

一、准备阶段

  1. 孔板选择:选择通常为聚苯乙烯或聚丙烯材质的96孔板。

  2. 表面羧基化:若孔板表面无羧基,需通过等离子体处理、化学氧化或硅烷化等方法引入羧基。

  3. 清洗孔板:用去离子水或PBS缓冲液冲洗孔板,去除表面杂质。

二、活化阶段

  1. 配制EDC/NHS溶液:将EDC(如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)和NHS按一定比例(如1:1)溶解在缓冲液(如MES,pH 4.5-6.0)中。

  2. 加入孔板:每孔加入适量EDC/NHS溶液,室温孵育15-30分钟,使羧基充分活化。

  3. 清洗孔板:弃去活化液,用缓冲液冲洗孔板,以去除未反应的EDC和NHS。

三、固定阶段

  1. 加入目标分子溶液:加入含目标分子(如抗体、蛋白质)的溶液,室温孵育1-2小时或4℃过夜,使NHS酯与氨基反应形成酰胺键。

  2. 清洗孔板:弃去固定液,用缓冲液冲洗孔板,以去除未结合的目标分子。

四、封闭阶段

  1. 加入封闭剂:加入封闭剂(如5% BSA或脱脂奶粉),室温孵育1-2小时,封闭未反应的羧基,减少非特异性吸附。

  2. 清洗孔板:弃去封闭液,用缓冲液冲洗孔板,干燥后密封保存(通常4℃可保存数月)。

五、使用前预处理

使用前需根据实验需求进行预处理,如洗涤、孵育等。

关于我们:

陕西星贝爱科生物科技经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记物、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近红外荧光染料,聚苯乙烯微球,上转换纳米发光颗粒,MRI核磁造影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。

温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!

相关产品:

CTAB修饰银纳米颗粒

PEI修饰银纳米颗粒

高单分散银纳米颗粒

银纳米棒

二氧化硅包覆银纳米颗粒

中孔介孔二氧化硅

介孔二氧化硅纳米棒

链霉亲和素(SA)修饰二氧化硅微球

氨基介孔二氧化硅纳米颗粒