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DADPS-生物素-炔基(DADPS Biotin Alkyne)的具体用途

2026-05-20 [8]

CAS:2241685-22-1 | 分子量:827.12 | 分子式:C₄₂H₆₂N₄O₉SSi

该试剂的核心价值在于:消除了传统链霉亲和素-生物素亲和纯化中"标记后无法温和释放"的最大痛点,同时兼具点击化学偶联能力。以下是六大具体用途:

一、可裂解亲和纯化

整个流程分为三步:

第一步,标记。炔基通过点击化学(CuAAC反应)与叠氮修饰的目标蛋白偶联,高效且专一。

第二步,捕获。生物素端与链霉亲和素柱结合,富集目标蛋白。

第三步,释放。用10%甲酸处理0.5小时,DADPS接头在温和酸性条件下断裂,释放出原始目标蛋白。释放后仅留下84.12 Da的小分子片段,几乎不影响蛋白功能,可获得无标签残留的高纯度目标蛋白。这是传统生物素纯化(需煮沸SDS或强变性条件)无法做到的。

二、蛋白质组学研究

在复杂样品(如细胞裂解液、血清)中,通过点击反应标记低丰度蛋白,再利用生物素-亲和素系统特异性捕获。DADPS酸解释放后可直接进行质谱鉴定,大幅提高低丰度蛋白的检测灵敏度。特别适合蛋白质互作研究(Pull-down)和翻译后修饰分析。

三、生物分子标记与点击化学偶联

针对不同标记对象,炔基均可与叠氮基团通过CuAAC反应高效偶联:

标记蛋白质时,炔基与叠氮修饰蛋白反应,用于蛋白质荧光标记和固定化。

标记核酸时,炔基与叠氮修饰核酸反应,用于核酸探针构建和FISH。

标记细胞表面受体时,炔基与代谢标记的叠氮糖反应,通过SPAAC实现活细胞表面分子标记。

标记药物分子时,炔基与叠氮药物反应,用于药物-生物素偶联物的制备。

四、药物递送与ADC研究

作为智能连接子用于制备抗体-药物偶联物(ADC)。炔基与药物分子的叠氮基团点击偶联,生物素端用于后续亲和纯化以提高ADC产品纯度。同时利用DADPS的酸敏感可裂解特性,在肿瘤微环境(弱酸性pH)下实现药物的靶向可控释放,有效降低系统毒性。

五、活细胞成像与流式细胞术

通过无铜点击化学(SPAAC)在活细胞内标记靶标分子(膜蛋白、核酸等),避免铜离子的细胞毒性。再利用亲和素-荧光探针(如Streptavidin-FITC)实现成像。DADPS的化学稳定性确保标记分子在成像过程中不降解,保证信号持续性。在流式细胞术中可用于细胞表面标志物的高灵敏度检测。

六、纳米材料功能化

将DADPS-Biotin-Alkyne通过点击化学连接至叠氮修饰的纳米载体(脂质体、聚合物纳米粒、金纳米粒子等)表面,实现纳米材料的靶向递送与可控释放双重功能。生物素端还可进一步连接靶向配体(如抗体、多肽),构建多功能纳米平台。

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