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Diazo Biotin-PEG3-azide有哪些用途?

2026-06-08 [8]

Diazo Biotin-PEG3-azide(CAS: 1339202-33-3)的用途如下:

一、光亲和标记——捕获瞬时蛋白互作

重氮基团(-N₂)在约350 nm紫外光照射下释放高活性卡宾,能与3 Å内任何C-H、N-H、O-H键共价交联。这意味着它可以在活细胞或裂解液中"无差别"捕获蛋白-蛋白、蛋白-配体的瞬时互作,再通过生物素-链霉亲和素系统富集鉴定。普通生物素试剂做不到这一点。

二、点击化学偶联——引入生物素标签

末端叠氮基(-N₃)可与炔基分子发生Cu(I)催化的点击反应(CuAAC),生成稳定的1,2,3-三唑环。也可与DBCO、BCN发生无铜点击化学(SPAAC)。用途包括:将生物素引入含炔基修饰的蛋白质、核酸、多糖;将荧光染料、药物分子通过点击化学连接到生物素端,再用链霉亲和素系统捕获检测。

三、可释放亲和捕获——质谱样品回收

经Na₂S₂O₄,50–100 mM,pH 7.4,37°C,30 min处理后,可从链霉亲和素上温和释放捕获的生物素化分子。普通生物素与链霉亲和素结合后几乎不可逆释放,这一特性使它特别适合做质谱鉴定前的"富集-释放"流程。

四、PROTAC分子合成——连接子(Linker)

作为PEG类PROTAC linker,PEG3提供适当柔性与水溶性,叠氮端用于点击化学组装,重氮生物素端用于后续纯化验证。PROTAC利用泛素-蛋白酶体系统降解靶蛋白,这是当前药物研发的热点方向。

五、生物分子标记与检测

可用于标记蛋白质、核酸、多糖等生物分子,实现定位、检测和分离纯化。PEG3间隔臂(约13.2 Å)提升水溶性,减少非特异性吸附,降低与链霉亲和素结合时的空间位阻。适用于Western Blot(链霉亲和素-HRP检测)、ELISA、流式细胞术、免疫沉淀等。

六、活细胞成像与表面标记

叠氮端与炔基修饰的荧光染料点击反应,可实现细胞表面分子的实时成像。重氮基团还可用于光控嵌入脂质膜或膜蛋白,再通过生物素端桥接检测。

七、靶向药物递送

作为偶联子,将药物分子与生物素化靶向配体连接,通过生物素-受体识别进入特定细胞,提高药物选择性并降低副作用。

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