PC-Biotin-PEG4-NHS carbonate的用途有哪些?
2026-06-09
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PC-Biotin-PEG4-NHS carbonate 的用途
这是一种将 光可裂解基团(PC)、四聚乙二醇链(PEG4) 与 NHS碳酸酯活性基团 整合于生物素上的多功能交联试剂,仅供科研使用,不可用于人体。
CAS号:2055198-03-1,分子量约810.87,外观为白色至淡黄色固体。
核心用途
一、蛋白质/抗体生物素化
NHS碳酸酯与目标分子上的伯胺(-NH₂,如赖氨酸残基、N-末端)特异性反应,形成稳定的氨基甲酸酯键(carbamate linkage),在pH 7.0–9.0缓冲液中即可高效完成标记。标记后的蛋白质可通过生物素-链霉亲和素体系进行检测、分离和纯化,广泛用于Western blot、ELISA、免疫荧光、流式细胞术等实验。
二、光控可逆捕获与释放
生物素端与链霉亲和素珠结合后,用365 nm近紫外光(1–5 mW/cm²)照射5–25分钟,PC基团断裂,释放效率通常超过90%。这意味着捕获的目标蛋白可以无需化学试剂洗脱就完整释放,避免了生物素竞争洗脱或变性条件对蛋白结构的破坏,特别适合下游质谱分析和蛋白质组学研究。
三、亲和纯化
利用生物素-链霉亲和素的超高亲和力(Kd ~10⁻¹⁵ M)高效捕获生物素化蛋白,随后通过光照温和释放目标蛋白,替代传统的 harsh elution 条件,保持蛋白天然构象和活性。
四、蛋白质-蛋白质互作研究
将"诱饵"蛋白生物素化后固定在链霉亲和素珠上,捕获与之互作的"猎物"蛋白,再通过紫外光照释放整个复合物,用于质谱鉴定互作伙伴。相比化学洗脱,光释放能更好地保留弱相互作用和蛋白复合物完整性。
五、PROTAC linker
作为PROTAC分子的连接子组分使用。PROTAC由E3泛素连接酶配体和靶蛋白配体通过linker连接而成,PC-Biotin-PEG4-NHS carbonate可提供含PEG4间隔臂的可光裂解连接结构,用于合成靶向蛋白降解药物。
六、生物传感器开发
通过生物素与亲和素/链霉亲和素的特异性结合实现信号放大与分子检测。PC基团赋予传感器"光控开关"能力,可在检测后通过光照释放捕获分子,实现传感器的重复使用。
七、细胞表面标记与内吞研究
NHS碳酸酯与细胞表面蛋白的伯胺反应,将生物素引入细胞表面。结合链霉亲和素荧光探针可追踪蛋白内吞、转运等动态过程,光照后可释放标记实现时间可控实验。
八、纳米材料表面功能化
适用于生物芯片、微流控芯片、纳米颗粒、脂质体等表面修饰。PEG4链提供空间隔离、降低非特异性吸附,生物素端用于亲和捕获,PC基团实现光控释放,为多模态诊疗平台提供技术基础。
九、ADC linker(抗体偶联药物连接子)
作为含4单元PEG的可降解连接子,用于ADC合成。光可裂解特性可在靶点实现药物的可控释放,提高治疗精准度并降低脱靶毒性。
使用注意事项
全程避光操作,PC基团对紫外光敏感,提前照射会导致提前裂解。
NHS碳酸酯对水分敏感,水溶液需现配现用,避免长时间放置导致水解失活。
标记反应推荐pH 7.2–8.5,过高pH会加速NHS水解。
储存条件:-20°C以下,避光、干燥,分装保存,避免反复冻融。
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温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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