CY5-乳铁蛋白,Cy5-LF,花青素Cy5标记乳铁蛋白
2026-10-22
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基本定义与核心特性
CY5-乳铁蛋白(Cy5-Lactoferrin,简称Cy5-Lf)是将花青素类近红外荧光染料Cy5通过共价偶联连接到乳铁蛋白分子上的双功能探针,完整保留了乳铁蛋白的天然生物活性和Cy5优异的近红外光学性能。
光谱参数:最大激发波长646~649nm,最大发射波长662~670nm,适配共聚焦显微镜、小动物近红外成像系统、流式细胞仪的常规Cy5检测通道
偶联方式:通过Cy5的NHS活性酯基团与乳铁蛋白表面赖氨酸残基的游离氨基形成稳定的酰胺键,通过控制标记摩尔比,避免过度标记破坏蛋白空间构象
核心优势:相比FITC等可见光荧光探针,Cy5的近红外信号生物样本自发荧光干扰极低,组织穿透深度可达数毫米,信噪比提升数倍,无需同位素标记就能实现从细胞到活体动物的多尺度示踪
外观状态:蓝紫色冻干粉,易溶于水和生理缓冲液,常规科研级产品纯度可达95%以上
合成与纯化流程
缓冲体系准备:将乳铁蛋白溶解在pH 8.0~8.3的无氨基碳酸盐缓冲液中,绝对避免使用Tris、甘氨酸等含游离氨基的缓冲体系,防止和Cy5-NHS发生竞争性反应。
标记反应:按照Cy5与乳铁蛋白摩尔比1.5:1~2:1的比例,将提前用无水DMSO溶解的Cy5-NHS溶液缓慢滴加到蛋白溶液中,室温避光搅拌反应2~4小时。
分离纯化:反应结束后通过葡聚糖凝胶G-25柱或者透析法去除游离的未结合Cy5染料,收集蛋白组分后通过超滤浓缩得到纯化产物。
质量验证:通过紫外分光光度法分别测定280nm(蛋白特征吸收)和650nm(Cy5特征吸收)的吸光度,计算标记率,控制每个乳铁蛋白分子上结合1~2个Cy5分子,这个区间既保证荧光信号强度,又不会发生荧光自淬灭,保留乳铁蛋白的受体结合活性。
使用与储存注意事项
该产品仅用于科研实验,严禁直接用于人体或临床诊断。
冻干粉状态需在-20℃避光密封干燥保存,保质期12个月,使用前先置于室温回温30分钟以上再开盖,防止低温环境下吸潮导致蛋白变性。
水溶液建议现配现用,严格避免反复冻融,操作过程全程避光,长时间强光照射会导致Cy5发生光漂白,造成荧光信号不可逆衰减。
关于我们:
陕西星贝爱科生物科技经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记物、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近红外荧光染料,聚苯乙烯微球,上转换纳米发光颗粒,MRI核磁造影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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