琼脂糖微球的制备方法和应用
琼脂糖微球是一种广泛应用于生物科学领域的惰性载体,具有良好的生物相容性和亲水性,且分子上富含羟基。
琼脂糖微球的制备方法
琼脂糖微球的制备涉及到多个步骤,包括制备琼脂糖微球、制备分散相、乳化和固化成球等。以下是具体的制备步骤:
制备琼脂糖微球:将琼脂糖溶解在加热的水中,搅拌均匀。加热时间的长短会影响微球的粒径和分散系数。如果加热时间过短,琼脂糖并未全部溶解,可能会形成较大颗粒;如果加热时间过长,琼脂糖可能会发生一定程度的水解,分子量下降,这有利于在分散相中形成较为均匀的微球,但会对手工操作带来困难。
制备分散相:将Span80溶解在有机溶剂中,加热到80℃。
乳化:将琼脂糖溶液导入分散相,不断搅拌,乳化20min左右。乳化剂用量不足或过多都会影响微球的形态和均匀性。
固化成球:逐渐降低温度,降低到室温后琼脂糖微球基本就成型了。加入去离子水并静置2小时以上,对微球进行洗涤去除有机相,得到未交联的琼脂糖微球。
进行交联:微球可以在碱性条件下与交联剂反应,常用的交联剂有环氧氯丙烷等短链交联剂、丙二醇缩水甘油醚等长链交联剂。交联时间的长短会影响琼脂糖微球的孔隙率和机械性能。
琼脂糖微球的应用
琼脂糖微球作为一种惰性载体,广泛应用于生物大分子的分离纯化中。其优点包括多孔性、亲水性、不含带电基团以及多糖链上的羟基在一定的条件下可以偶联上不同的配基等。此外,通过适当的化学修饰,琼脂糖微球可以成为具有特殊功能的磁性琼脂糖微球,用于偶联或分离纯化不同的物质。
琼脂糖微球的特性
琼脂糖微球具有以下特性:
良好的生物相容性和亲水性:这使得琼脂糖微球在生物大分子的分离纯化中发挥了重要作用。
表面惰性,非特异性吸附低:琼脂糖微球的表面惰性使其在生物大分子分离纯化中具有较低的非特异性吸附,这对于提高纯化效率非常重要。
容量大,具有开放性的支撑骨架:琼脂糖微球的开放性支撑骨架使其具有较大的容量,适合于大规模的生物大分子分离纯化。
机械性能和力学性能较差:虽然琼脂糖微球的机械性能相对较差,但在许多生物科学应用中,这并不是一个关键问题。
溶胀程度会随溶剂性质变化:琼脂糖微球的溶胀程度会受到溶剂性质的影响,这可能会影响到其在特定应用中的性能。
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