SA 聚苯乙烯红色荧光微球/链霉亲和素修饰红光 PS 探针的选型建议

链霉亲和素修饰红色聚苯乙烯荧光微球（SA-PS Red），以交联聚苯乙烯（PS）为骨架，表面共价固定链霉亲和素（Streptavidin, SA），内嵌红色荧光染料，属于沉降型正向亲和功能微球。

一、基础物性参数：

• 基质：交联聚苯乙烯 PS

• 密度：约 1.05 g/cm³，PBS 缓冲液中沉降

• 折射率：1.59

• 粒径区间：50 nm ~ 100 μm；常用规格：200 nm、500 nm、1 μm、2 μm、5 μm、10 μm

• 荧光参数：内嵌红色荧光染料，Ex 550–580 nm，Em ~605 nm，匹配 TRITC 通道；和 DAPI 蓝、FITC 绿光微球组合，光谱区分度好，串扰低，适合多色同步成像

• 表面功能：共价偶联链霉亲和素 SA，SA 固载量可按需定制

• 分散介质：pH7.2 PBS 悬浮液；支持干粉形态；可定制无菌无叠氮钠细胞级版本

• 溶剂耐受：交联 PS 耐受醇、二氯甲烷、甲苯等中弱极性有机溶剂；强芳香溶剂长时间浸泡仍存在溶胀风险，正式实验前建议预实验验证

二、制备工艺

• 核心采用种子溶胀聚合法或分散聚合法先合成单分散聚苯乙烯微球，以苯乙烯为单体，二乙烯基苯为交联剂，过硫酸钾为引发剂，在乙醇/水介质中进行聚合，得到粒径均一的聚苯乙烯微球；随后通过共聚引入丙烯酸或甲基丙烯酸缩水甘油酯，使微球表面带上羧基或环氧基团。

• 荧光染料的掺入可在聚合阶段加入油溶性红色荧光染料（如尼罗红），或采用溶剂溶胀法将染料扩散至微球内部，全程严格控制反应温度与氮气气氛，精准调控聚合反应速率，避免二次成核导致粒径分布变宽。

• 链霉亲和素的偶联采用碳二亚胺法：将微球分散于MES缓冲液（pH 6.0）中，加入EDC和NHS活化羧基，活化30分钟后离心洗涤，再加入链霉亲和素溶液（浓度0.5–2 mg/mL），在4°C下反应4–6小时，最后用甘氨酸封闭未反应的活化位点，后续通过多轮高速离心、PBS缓冲液反复洗涤去除未反应杂质，全程低温避光操作避免荧光淬灭与蛋白变性。

三、横向选型小结

• SA-PS Red：交联 PS、TRITC 红光、链霉亲和素，沉降正向亲和，耐有机溶剂，适合有机相衍生 + Biotin 配体捕获

• SA-PMMA Red：PMMA 红光 SA 微球，低非特异吸附，仅限纯水相，不耐丙酮等溶剂

• SA-PE Red：上浮型红光 SA 微球，面向水油界面、Pickering 乳液两相示踪

• Biotin-PS Red：Biotin 修饰红光 PS 微球，反向亲和，用于 SA 标记探针捕获

羧基修饰的红色乳胶微球400nm

羧基修饰聚苯乙烯荧光微球100nm，激发488nm，发射515nm

无基团绿色荧光微球100nm

氨基磁性四氧化三铁微球包裹二氧化硅 粒径：100-200nm

羧基化聚苯乙烯微球，1um

二氧化硅包四氧化三铁100nm-200nm 

特异性探针偶联时间分辨荧光微球200nm

随机探针偶联时间分辨荧光微球200nm

100nm羧基微球

稀土铕红色荧光氨基聚苯乙烯微球100nm

蓝色荧光氨基聚苯乙烯微球 100nm

羧基橙色荧光微球10um

稀土铕红色荧光聚苯乙烯微球 粒径80nm

聚苯乙烯黄色荧光微球100nm

氨基磁珠 500nm

磁性聚苯乙烯微球300nm

单分散聚苯乙烯微球100nm

100nm氨基微球

聚苯乙烯绿色荧光微球300nm