辣根过氧化物酶-醛基|HRP-CHO
辣根过氧化物酶-醛基(HRP-CHO)是辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)经过特定处理(如醛基化)后的一种形式。以下是对辣根过氧化物酶-醛基的详细介绍:
一、来源与组成
辣根过氧化物酶广泛分布于植物界,以辣根中含量最高。它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉辅基组成的一种糖蛋白,含有约18%的中性糖和氨基糖(如甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等)。
二、结构与性质
结构:辣根过氧化物酶由300多个氨基酸和4个二硫键连接而成,相对分子质量约为40,000~44,000。其中,中性辣根过氧化物酶同工酶C(HRP C)是研究得较为清楚、应用也较为广泛的一种同工酶。
性质:辣根过氧化物酶的等电点为5.5~9.0,最适pH为5~5.5(也有说法认为最适pH为7.0,这可能与供氢体不同而有所差异),最适温度为40~45℃。它易溶于水和58%以下的饱和硫酸铵溶液。
三、醛基化处理
醛基化是为了提高辣根过氧化物酶在酶标记过程中的效率和稳定性。常用的醛基化方法包括过碘酸钠氧化法。该方法利用过碘酸钠氧化辣根过氧化物酶的含糖部分,形成醛基,这些醛基再与免疫球蛋白(如IgG)的氨基结合,形成稳定的酶标抗体。一些生物技术公司还在传统方法的基础上进行了优化,如采用优化的高碘酸钠氧化法,以提高酶的利用率和标记后抗体的活性。
四、应用
酶标记技术:辣根过氧化物酶-醛基主要用于酶标记技术,特别是在免疫测定和化学发光等领域。通过与抗体或抗原结合,辣根过氧化物酶-醛基可以实现对目标分子的灵敏检测。
生物传感器:利用辣根过氧化物酶-醛基的氧化催化能力,可以构建电化学或光学传感器,用于检测生物分子如葡萄糖、胆固醇等。
其他领域:辣根过氧化物酶-醛基还可用于污水处理、食品添加剂、核酸检测等领域。例如,在污水处理中,辣根过氧化物酶-醛基可以催化污染物氧化成自由基,从而降低对环境的污染。
五、注意事项
辣根过氧化物酶-醛基应储存在适当的条件下,避免高pH和含有氨基的物质,也应避免光线照射。
在使用辣根过氧化物酶-醛基时,应遵循产品说明书中的指导,以确保其稳定性和活性。
辣根过氧化物酶-醛基|HRP-CHO
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