生育酚标记辣根过氧化物酶|Tocopherol-HRP
生育酚标记辣根过氧化物酶(Tocopherol-Peroxidase Conjugate,Tocopherol-HRP)是一种通过化学交联方法获得的标记物,由生育酚(Tocopherol)与辣根过氧化物酶(Peroxidase,HRP)结合而成。以下是对其的详细介绍:
一、组成成分
生育酚:生育酚是一类脂溶性维生素,共有α、β、γ、δ四种类型,其中以α-生育酚的生物活性最高。它具有抗氧化性,能够保护生物膜中的不饱和脂肪酸、蛋白质巯基和其他生物活性物质免受自由基的攻击。
辣根过氧化物酶:辣根过氧化物酶是一种糖蛋白,含有一个铁卟啉辅基(血红素)作为其活性中心。它广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒,是试剂盒显色体系的关键成分。
二、制备过程
活化生育酚:通常需要先对生育酚进行活化,使其带有合适的活性基团以便与过氧化物酶进行共价连接。例如,可将生育酚转化为生育酚琥珀酸酯等带有羧基的衍生物。
活化过氧化物酶:过氧化物酶可能也需要进行预处理,以增加其反应活性位点。这可能包括对酶表面的某些氨基酸残基进行修饰或者改变其周围的化学环境。
交联反应:使用合适的交联试剂(如碳化二亚胺类试剂)将活化后的生育酚衍生物和过氧化物酶进行共价连接。在交联反应过程中,需要精确控制反应条件,包括试剂的浓度、反应时间和温度等,以确保得到高质量的生育酚-过氧化物酶标记物。
三、性质与用途
溶于PBS:生育酚标记辣根过氧化物酶可溶于PBS(pH7.4)中,通常含有BSA及甘油等酶稳定剂。
用于抗体制备:生育酚标记辣根过氧化物酶可作为标记物用于抗体的制备,特别是针对生育酚的特异性抗体。
用于免疫检测:在酶联免疫吸附测定(ELISA)等免疫分析中,生育酚标记辣根过氧化物酶可作为检测试剂。通过与含有生育酚抗体的反应体系混合,可以定量检测待测样本中的生育酚含量。
四、储存条件
为了确保生育酚标记辣根过氧化物酶的活性和稳定性,应将其储存在适当的条件下,如低温、避光、干燥等。
生育酚标记辣根过氧化物酶|Tocopherol-HRP
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