鸡卵清蛋白-维甲酸偶联物(OVA conjugated Retinoic acid Hapten)是一种通过化学交联技术获得的复合物,由维甲酸(Retinoic acid,也被称为视黄酸)与载体蛋白——鸡卵清蛋白(Ovalbumin,简称OVA)结合而成。以下是其详细介绍:
结构特性
组成:鸡卵清蛋白是卵清中的主要蛋白质成分,由386个氨基酸组成,分子量约为45kD,具有多个可反应的官能团,如氨基和羧基,可用于与维甲酸等小分子化合物偶联。维甲酸通过化学键(如酰胺键、酯键等)与OVA的某个或多个官能团结合,形成稳定的偶联物。偶联物的具体结构取决于偶联方法和反应条件,如pH值、温度、反应时间和反应物浓度等。
溶解性:该偶联物通常溶于磷酸盐缓冲液(PBS)中,形成稳定的溶液。
性质
稳定性:经过化学交联后的偶联物具有较好的稳定性,可以在适当的保存条件下长期保存。
免疫原性:可作为抗原免疫动物,用于制备针对维甲酸的特异性抗体。这些抗体在生物医学研究中具有广泛的应用价值,如用于维甲酸的检测、分析以及药物研发等。
应用
免疫检测:该偶联物还可以包被于固相载体上,用于维甲酸及其抗体的检测。在酶联免疫吸附测定(ELISA)等免疫学检测方法中,鸡卵清蛋白-维甲酸偶联物可以作为包被抗原或检测抗体,提高检测的灵敏度和特异性。通过检测样品中针对该偶联物的抗体水平,可以间接评估样品中维甲酸的含量或存在状态。
生物医学研究:该偶联物可用于研究维甲酸的生物学功能、代谢途径和调控机制等。作为工具分子,它可用于筛选和鉴定与维甲酸相互作用的蛋白质、受体或药物。
疾病诊断与治疗监测:作为抗原制备针对维甲酸的特异性抗体,该偶联物在疾病诊断和治疗监测中具有潜在的应用价值。
制备与纯化
制备:使用适当的活化试剂对维甲酸进行活化,使其具有与OVA结合的活性官能团。将活化后的维甲酸与OVA在适当的条件下进行偶联反应。
纯化:使用适当的纯化方法(如透析、凝胶过滤、离子交换等)去除未结合的维甲酸和OVA。
保存与注意事项
保存条件:该偶联物应在低温条件下保存,如-20℃或以下温度,以保持产品的稳定性和活性。避免反复冻融或在较高温度(如4℃以上)久置,以保持产品的稳定性和活性。同时,应置于干燥、避光处保存,以防止氧化和降解。
注意事项:该偶联物仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途。
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