cas：149838-22-2，FM 1-43是一种广泛应用于神经科学和细胞生物学研究的荧光探针，其核心特性、应用场景及操作要点如下：
化学本质与基本性质
化学名称：N-(3-三乙基铵丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶二溴盐
分子量：611.54 g/mol
CAS号：149838-22-2
外观：橙色至红色固体
结构式：
溶解性：
水溶性：可溶于水，但需注意吸湿性（建议使用新开封的DMSO助溶）。
有机溶剂：易溶于DMSO（溶解度可达50 mg/mL，需超声助溶并控制温度<60℃）。
储存条件：
短期：4℃密封避光保存（避免反复冻融）。
长期：-80℃保存（6个月内使用），-20℃保存（1个月内使用）。
荧光特性
激发/发射波长：
溶剂中：Ex 480 nm，Em 626-636 nm（橙红色荧光）。
膜结合后：Em 565-590 nm（黄色荧光，Stokes位移大，需长通发射滤光片）。
荧光行为：
水溶液中几乎不发光，插入细胞膜后荧光显著增强。
膜结合后荧光光谱蓝移，便于与背景信号区分。
核心应用场景
神经科学研究：
突触囊泡循环：标记主动释放神经递质的神经元，通过内化进入可回收突触囊泡，实现神经末梢高亮度染色。
机械转导通道研究：作为毛细胞机械传递通道的渗透阻滞剂，用于耳毒性机制研究（如降低氨基糖苷类抗生素的耳毒性）。
活性依赖性机制：结合KCl刺激法，动态追踪突触小泡的释放与回收。
细胞生物学研究：
细胞膜通透性检测：通过荧光强度反映细胞膜的通透性和流动性。
膜电位研究：敏感反映细胞膜电位变化，用于检测神经细胞兴奋性和离子通道功能。
成像技术兼容性：
适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪等设备。
实验操作要点
工作液配制：
储备液：用DMSO配制5 mM储备液（需超声助溶）。
工作液：用预热HBSS溶液稀释至5-20 μM（现用现配）。
细胞标记流程：
悬浮细胞：
贴壁细胞：
培养于无菌盖玻片上，移除培养基后加入100 μL染料工作液。
孵育5-30分钟后，用培养基洗涤2-3次，成像观察。
离心收集细胞，PBS洗涤两次。
加入1 mL FM 1-43工作液，室温孵育5-30分钟。
离心弃上清，PBS洗涤两次后重悬，用于成像。
非特异性染色去除：
标记后通过洗涤（如PBS或培养基）轻松去除细胞表面非特异性结合的染料。
固定样本处理：
若需固定样本，选择FM 1-43FX（醛类固定剂兼容版本），避免普通FM 1-43在固定过程中丢失信号。
注意事项
毒性：对细胞无毒，但需避免反复冻融导致降解。
避光操作：荧光探针对光敏感，所有步骤需在避光条件下进行。
设备兼容性：使用典型荧光素（如FITC）或GFP光学滤光片组，但需注意其发射光谱与四甲基罗丹明（TRITC）滤光片不兼容。
cas：149838-22-2，FM 1-43
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