cas：1239946-52-1，FM 4-64是一种膜选择性红色荧光染料，属于苯乙烯基吡啶染料的 FM 家族，具有亲脂性，能够特异性结合细胞膜和内膜细胞器（如液泡膜、核膜、内质网等），并发出强烈的红色荧光。以下是关于 FM 4-64 的详细介绍：
一、基本信息
中文名：苯乙烯基染料 FM 4-64（或 NeurotransRed C2、SynaptoRed™ C2）
英文名：FM 4-64
CAS 号：1239946-52-1
分子式：C₃₀H₄₅Br₂N₃
分子量：607.51
外观性状：紫色固体粉末
溶解性：溶于水、DMSO（二甲基亚砜）等大部分有机溶剂
储存条件：-20℃ 避光干燥保存，避免反复冻融
结构式：
二、荧光特性
最大激发波长：558 nm
最大发射波长：734 nm
荧光强度：高荧光强度，适用于荧光显微镜、流式细胞仪等设备的观察
荧光稳定性：具有良好的化学稳定性和光稳定性，可在实验过程中保持稳定的荧光信号
三、作用机制
FM 4-64 是一种亲脂性染料，其分子结构中的亲脂性尾部（两个碳链）和带阳离子的高亲水性头部使其能够插入脂膜表面。在水溶液中，FM 4-64 基本无荧光；但一旦与细胞膜或内膜细胞器结合，其荧光强度会显著增强，从而实现对细胞膜和内膜细胞器的特异性标记。
四、应用领域
细胞膜和内膜细胞器标记：
FM 4-64 可用于标记活细胞或固定细胞的细胞膜、液泡膜、核膜、内质网等内膜细胞器，观察其形态和动力学变化。
在酵母细胞中，FM 4-64 是研究液泡分裂、融合以及液泡蛋白质分拣蛋白突变体液泡形态的重要工具。
胞吞和胞吐作用研究：
FM 4-64 可用于示踪酵母整体膜的内吞化和运输到液泡的过程，研究胞吞和胞吐作用的机制。
通过观察 FM 4-64 标记的膜结构的动态变化，可以揭示细胞内物质运输和能量转换的奥秘。
囊泡运输研究：
FM 4-64 可用于标记囊泡膜，观察囊泡的形成、运输和融合过程，研究囊泡运输的分子机制。
细胞器组织研究：
FM 4-64 可用于研究细胞器的组织结构和功能关系，揭示细胞器在细胞生命活动中的作用。
双色实时观察：
FM 4-64 与呈绿色荧光的 FM 1-43 在合适的滤片下能够区分开，允许双色实时观察膜的再循环过程。
五、使用注意事项
避光操作：
FM 4-64 是一种荧光染料，对光敏感。在储存、配制和使用过程中应严格避光，以防止荧光淬灭。
避免反复冻融：
FM 4-64 固体粉末在反复冻融过程中容易降解或失活。因此，应将储存液分装后保存，避免反复冻融。
现配现用：
FM 4-64 工作液应现配现用，以保证其荧光强度和稳定性。长时间放置会导致荧光淬灭或染料降解。
控制浓度和孵育时间：
在使用 FM 4-64 进行细胞标记时，应控制染料的浓度和孵育时间。过高的浓度或过长的孵育时间可能导致非特异性标记或细胞毒性。
注意细胞类型和实验条件：
不同细胞类型对 FM 4-64 的敏感性和标记效果可能存在差异。因此，在使用前应进行预实验，优化实验条件。
六、优势与局限性
优势：
高荧光强度和稳定性：FM 4-64 具有高荧光强度和良好的光稳定性，适用于长时间观察和动态过程研究。
特异性标记：FM 4-64 能够特异性结合细胞膜和内膜细胞器，实现对这些结构的精确标记。
水溶性好：FM 4-64 具有良好的水溶性，便于实验操作和制备。
与生物分子结合能力强：FM 4-64 可以与蛋白质、核酸等生物分子结合，为研究这些分子的功能和结构提供便利。
局限性：
荧光淬灭问题：所有荧光染料都存在淬灭问题，FM 4-64 也不例外。在保存和操作过程中应严格避光，以防止荧光淬灭。
细胞毒性：虽然 FM 4-64 对细胞无毒性或毒性较低，但在高浓度或长时间孵育条件下仍可能对细胞产生一定影响。因此，在使用时应注意控制染料的浓度和孵育时间。
cas：1239946-52-1，FM 4-64
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