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cas:72040-63-2,Biotin-LC-NHS,生物素-X,琥珀酰亚胺酯的概述

2025-10-28 [18]

Biotin-LC-NHS 是一种广泛应用于生物化学和分子生物学领域的生物素化试剂,其核心功能是将生物素分子共价连接到含氨基(-NH₂)的生物分子上,如蛋白质、抗体和核酸等。

化学结构与组成

Biotin-LC-NHS 的核心结构由三部分组成:

  1. 生物素(Biotin):一种水溶性、非毒性维生素(维生素H或B7),具有与亲和素(Streptavidin)或链霉亲和素(Avidin)高亲和力结合的特性,结合亲和常数较高(Kd ~10⁻¹⁵ M),确保标记分子与靶分子形成稳定复合物。

  2. 长链间隔臂(LC, Long Chain):通常是一个由6-12个碳原子组成的柔性链状结构,如6-氨基己酸长链。其作用是增加生物素与目标分子之间的距离,减少空间位阻,提高标记效率,同时保持标记分子的生物活性。

  3. 活性N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS):分子末端的NHS酯能与蛋白质或多肽中的自由氨基(如赖氨酸残基)进行共价偶联,形成稳定的酰胺键。NHS酯在水溶液中水解速率可控,需在pH 7–9的缓冲液中操作以确保反应效率。

物理与化学性质

  • 外观:通常为白色至浅黄色固体。

  • 溶解性:易溶于有机溶剂如二甲基亚砜(DMSO)、乙腈或二氯甲烷,同时在水相中缓慢水解。

  • 稳定性:在干燥、有机溶剂或低温条件下相对稳定,可长期储存。但在水溶液中易水解,需在使用前新鲜配制或在有机溶剂中保存。

功能与应用

  1. 蛋白质标记

    • 用于标记抗体、酶等蛋白质,便于后续的检测或纯化。

    • 标记后的蛋白仍保持结构完整性和生物活性,广泛用于免疫学实验中抗体或蛋白质的高效标记,如ELISA、Western blot、免疫沉淀等。

  2. 核酸标记

    • 标记DNA或RNA,用于杂交实验或测序。

  3. 细胞表面标记

    • 标记细胞表面的蛋白质,研究细胞间相互作用。

  4. 分子捕获与纯化

    • 通过亲和素磁珠或亲和层析,实现蛋白或核酸分子的高效捕获和纯化。

  5. 生物传感器和芯片技术

    • 在生物传感器和蛋白质芯片中,用于稳定固定蛋白或配体,实现高灵敏检测。

  6. 药物递送与靶向研究

    • 用于构建生物素-亲和素系统的药物递送平台,实现靶向治疗或分子追踪。

使用注意事项

  • 储存条件:建议储存于-20°C的干燥环境中,避光避湿,以保持试剂的稳定性和活性。

  • 溶解试剂:将Biotin-LC-NHS溶解在无水DMSO或DMF中,确保全溶解。

  • 反应条件:将溶解后的试剂与目标分子(如蛋白质或核酸)在pH 7-9的缓冲液中混合,室温或4℃反应1-2小时。

  • 纯化:通过透析、凝胶过滤或亲和层析去除未反应的试剂。

  • 安全警示:仅用于科研,不能用于人体。

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温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!

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