cas：191671-46-2，Biotin-LC-Sulfo-NHS的介绍
2025-10-29
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Biotin-LC-Sulfo-NHS（磺基-NHS-LC-生物素）是一种水溶性胺反应性生物素化试剂，具有以下核心特点和应用：
一、化学结构与组成
生物素分子：作为标记基团，与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）结合，实现高亲和力检测与纯化。
长链己酸基团（LC）：提供空间间隔臂（spacer arm），减少生物素与目标分子间的空间位阻，优化标记效率。
磺化N-羟基琥珀酰亚胺酯基团（Sulfo-NHS）：赋予试剂水溶性，并使其在温和条件下（pH 7.0-9.0）与伯胺基团（-NH₂）发生特异性反应，形成稳定酰胺键。
二、物理化学性质
外观与溶解性：白色固体，溶于水及部分有机溶剂（如二甲基甲酰胺，DMF），生理缓冲液中溶解性优异，无需额外添加有机溶剂。
反应活性：
靶标：与含有伯胺基团的生物分子（如蛋白质、抗体）反应，尤其是赖氨酸残基的ε-氨基或多肽的氨基末端。
条件：在pH 7.0-9.0的缓冲液中反应，保持生物分子天然活性。
产物稳定性：形成的酰胺键稳定，适用于长期实验存储。
水溶性机制：磺酸钠基团（-SO₃Na）增强亲水性，防止试剂穿透细胞膜，确保仅标记细胞表面蛋白。
三、核心应用领域
蛋白质与抗体标记：
标记对象：抗体、重组蛋白、可溶性MHC/肽复合物等。
实验技术：免疫印迹（Western blotting）、免疫组化（IHC-P）、免疫沉淀（IP）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、流式细胞术（FC）等。
优势：通过生物素-亲和素系统实现目标分子的高效检测、定位与纯化。
细胞表面蛋白特异性标记
机制：试剂无法穿透完整细胞膜，仅标记暴露于细胞表面的伯胺基团。
应用场景：
研究受体与转运蛋白的表达与调控。
分析极化上皮细胞中膜蛋白的分布。
结合荧光或酶标记技术，实现细胞表面分子的可视化与定量。
蛋白质组学研究：
功能：标记重组蛋白质，便于通过亲和层析（如链霉亲和素磁珠）进行纯化。
优势：提高蛋白质纯度，减少非特异性结合，适用于后续质谱分析或功能研究。
四、操作优势
无有机溶剂需求：反应可在纯水相缓冲液中进行，简化实验流程。
高效标记：长链间隔臂减少空间位阻，提升标记效率。
细胞兼容性：非膜穿透性确保仅标记细胞表面分子，避免胞内蛋白干扰。
五、储存与使用注意事项
储存条件：干燥、-20℃避光保存，防止受潮或降解。
操作规范：
取用时保持干燥，避免反复冻融。
严格按推荐浓度使用，过量可能导致非特异性结合。
反应后需通过透析或超滤去除未反应试剂。
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