Desthiobiotin-PEG6-NHS ester，去硫鸟嘌呤-PEG6-NHS酯的性质
2025-11-12
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Desthiobiotin-PEG6-NHS ester是一种结合了脱硫生物素（Desthiobiotin）、六聚乙二醇链（PEG6）和N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS Ester）功能的化学试剂，在生物化学和分子生物学领域具有广泛应用，以下是对其的详细介绍：
结构式：
一、化学结构与特性
脱硫生物素（Desthiobiotin）：
是生物素（Biotin）的硫原子缺失衍生物，保留了生物素与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）结合的核心结构。
与链霉亲和素的结合亲和力略低于生物素（解离常数 ），但具有“软释放"特性，即在温和条件下（如添加游离生物素）可被竞争性置换，便于后续分离和纯化。
六聚乙二醇链（PEG6）：
由六个乙二醇单元组成的链，提供分子空间延展性，降低空间位阻，提高反应效率。
增加试剂的水溶性，减少非特异性结合，提高标记的特异性。
NHS Ester（N-羟基琥珀酰亚胺酯）：
是一种高效的胺反应基团，能够与含有伯胺（-NH₂）的分子（如蛋白质、核酸的赖氨酸残基或氨基修饰的寡核苷酸）发生特异性反应，形成稳定的酰胺键。
反应条件温和，通常在碱性缓冲液（pH 7-9）中进行，无需催化剂。
二、物理性质
外观：通常为白色至浅黄色固体。
溶解性：可溶于水及极性有机溶剂（如DMSO、DMF、乙腈），便于在各种缓冲体系中使用。
分子量：646.73 。
三、反应活性与应用
生物分子标记：
通过NHS Ester与蛋白质或核酸的伯胺基团反应，将脱硫生物素-PEG6共价连接到目标分子上，实现特异性标记。
标记后的分子可通过链霉亲和素修饰的磁珠、荧光探针或固相载体进行捕获、检测或成像，广泛应用于ELISA、Western Blot、免疫沉淀及流式细胞术。
蛋白质纯化与检测：
作为亲和标签，脱硫生物素-PEG6标记的蛋白质可通过链霉亲和素亲和柱进行纯化。
其“软释放"特性允许在温和条件下洗脱目标蛋白，减少对蛋白活性的影响，并避免与内源性生物素化分子的共洗脱。
细胞标记与成像：
由于脱硫生物素分子较小且PEG6链增加水溶性，NHS-Desthiobiotin-PEG6可穿透细胞膜，用于活细胞内蛋白质的标记和追踪。
结合链霉亲和素修饰的荧光探针，实现细胞内目标分子的可视化。
纳米材料功能化：
通过NHS Ester与纳米颗粒或聚合物表面的胺基反应，将脱硫生物素-PEG6修饰到纳米材料上。
结合链霉亲和素桥接，实现靶向捕获、信号放大或可控药物递送，在靶向诊断、分子传感和智能药物载体构建中具有显著优势。
四、特点
高亲和力与特异性：脱硫生物素与链霉亲和素的结合具有高选择性和特异性，确保标记的准确性。
温和洗脱条件：其“软释放"特性允许在温和条件下洗脱目标分子，保护蛋白活性并减少背景干扰。
化学活性可控：NHS Ester的高效胺反应性使标记过程快速、可控，适用于复杂生物体系。
空间灵活性：PEG6链提供分子空间延展性，降低空间位阻，提高反应效率。
多功能性：广泛应用于蛋白质标记、分子捕获、活细胞成像、纳米材料功能化和生物传感器开发，为高精度、高效率的分子偶联和生物化学研究提供可靠工具。
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