Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 是一种重要的生物素衍生物,在生物偶联和亲和纯化等领域应用广泛。以下是关于它的详细介绍:
基本信息
结构式:

化学结构:其结构中含有磺酰基(Sulfo-)、N - 羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-)和脱硫生物素(Desthiobiotin)部分。磺酰基使其具有良好的水溶性,NHS 酯可与氨基反应,脱硫生物素则能与链霉亲和素等亲和素特异性结合。
理化性质:通常为白色固体,密度约为 1.41g/cm³,酸度系数(pKa)约为 - 0.04,可溶于大部分有机溶剂,如 DCM、DMF、DMSO 等,在水中也有很好的溶解性。
作用机制:Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 中的 NHS 酯基团能与生物分子(如蛋白质、抗体、肽等)表面的氨基发生反应,形成稳定的酰胺键,从而将脱硫生物素标记到这些分子上。标记后的分子可利用脱硫生物素与链霉亲和素的高亲和力结合特性,进行后续的分离、纯化和检测。
主要应用
蛋白质标记与纯化:通过与蛋白质的伯胺基团共价结合,标记后的蛋白质可通过链霉亲和素树脂捕获,再利用生物素竞争性洗脱,温和地将蛋白质从树脂上分离下来,避免 harsh 条件损伤蛋白。
细胞表面标记:用于标记细胞膜蛋白时,长链间隔臂(LC)可减少空间阻碍,增强标记效率,适用于活细胞研究,后续可裂解 Desthiobiotin - 链霉亲和素相互作用进行分离。
相互作用研究:在 pull-down 实验中,将其偶联到诱饵蛋白上,可捕获与之结合的蛋白伴侣,用低 pH 或生物素溶液洗脱,能保留蛋白的天然构象,便于研究蛋白质之间的相互作用。
使用注意事项:应密封避光,储存于 - 20℃以下、阴凉干燥通风处,避免频繁解冻,现配现用。同时,要避免与含胺试剂(如 Tris、NaN₃)等一起使用,以免干扰反应,并注意优化标记比例,减少多标记导致的蛋白聚集。
关于我们:
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