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cas:139554-72-6,Biotin-Mal,生物素修饰马来酰亚胺的相关描述

2025-11-17 [40]

生物素修饰马来酰亚胺是一类结合了生物素高亲和力与马来酰亚胺巯基反应活性的化学试剂,在生物分子标记、蛋白质功能化及靶向递送系统构建中应用广泛。

一、基本特性

  • 生物素(Biotin):一种小分子维生素,能与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)形成极稳定的复合物,解离常数Kd≈10^-15M,为分子提供靶向定位能力。

  • 马来酰亚胺(Maleimide):含双键,可与含巯基(-SH)的分子(如半胱氨酸残基)发生特异性Michael加成反应,形成稳定的硫醚键。反应条件温和(pH 6.5-7.5),避免使用含巯基的缓冲液(如Tris),推荐使用PBS或HEPES。

二、功能优势

  1. 定点修饰:通过马来酰亚胺与蛋白质中半胱氨酸的巯基反应,实现特异性标记,保留蛋白质活性。

  2. 荧光标记:结合荧光染料(如FITC)构建荧光标记的生物分子,用于细胞成像、流式细胞术等。

  3. 蛋白质纯化:标记后利用生物素-亲和素系统分离目标蛋白,适用于Western blot、ELISA等检测。

  4. 修饰含巯基的DNA或RNA探针:结合生物素-亲和素系统进行信号放大,提高检测灵敏度。

  5. 抗体-药物偶联物(ADC):通过马来酰亚胺将药物连接至抗体,实现靶向递送。

  6. 纳米颗粒表面修饰:修饰纳米颗粒表面巯基,引入生物素功能,拓展其在生物成像、传感等领域的应用。

三、常见衍生试剂

  1. Biotin-PEG-MAL:通过聚乙二醇(PEG)连接生物素与马来酰亚胺,增加水溶性、减少非特异性结合,并降低免疫原性。PEG链提供柔性间隔臂,提高分子水溶性与生物相容性,同时降低非特异性吸附,增强表面覆盖性。

  2. UV-Tracer Biotin-CONH-MAL:嵌入二苯甲酮片段,可通过紫外光(365 nm)激发荧光,实时验证标记效率。

四、应用领域

  1. 生物医学研究:用于蛋白质、抗体、核酸等生物分子的标记和纯化,以及生物传感器的构建和检测。

  2. 药物传递系统:作为药物传递系统的组成部分,通过生物素与特定受体的结合,实现药物的靶向输送和控释。

  3. 生物材料表面修饰:用于生物材料表面的修饰,改善材料的生物相容性和功能特性。

五、使用注意事项

  1. 保存条件:固体粉末需避光、干燥条件下-20℃保存,避免反复冻融;溶液建议现配现用,未用完部分分装后-20℃避光冷冻。

  2. 缓冲液选择:使用PBS(pH 7.4)或HEPES,避免含巯基的缓冲液(如Tris)。

  3. 淬灭未反应基团:反应后加入过量β-巯基乙醇或半胱氨酸。

  4. 安全防护:操作时佩戴手套与护目镜,避免直接接触皮肤或眼睛。

关于我们:

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