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cas:41994-02-9,Biotinyl Tyramide,生物素-酪氨的应用

2025-11-21 [18]

生物素-酪氨(Biotin-Tyramide,CAS号:41994-02-9)是一种结合生物素(Biotin)与酪氨酰胺(Tyramide)的复合物,在生物医学研究和诊断领域具有重要应用。

一、化学结构与性质

  1. 生物素(Biotin)

    • 又称维生素H或辅酶R,具有环状结构(含咪唑酮环和戊酸侧链),与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)的结合亲和力较高(结合常数达10¹⁵ M⁻¹),是生物标记和信号放大的核心基团。

  2. 酪氨酰胺(Tyramide)

    • 酪氨酸的衍生物,含酚羟基,在过氧化氢(H₂O₂)和辣根过氧化物酶(HRP)催化下,可生成高度反应性的自由基,与邻近蛋白质(如抗原附近的酪氨酸残基)共价结合,实现信号放大。

  3. 复合物特性

    • 分子式:C₁₈H₂₅N₃O₃S,分子量约363.48。

    • 物理状态:固体/粉末,溶于水及多数有机溶剂。

    • 稳定性:需低温(-20℃)、干燥、避光保存,避免反复冻融。

结构式:

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二、核心应用领域

  1. 免疫组织化学(IHC)与细胞成像

    • 信号放大:通过HRP催化酪氨酰胺生成自由基,标记抗原附近蛋白质,结合链霉亲和素-生物素-酶复合物显色,显著提高低丰度抗原检测灵敏度。

    • 高灵敏度可视化:与荧光标记的链霉亲和素结合,实现细胞内特定蛋白质的高分辨率成像,为病理学研究提供工具。

  2. 原位杂交(ISH)

    • 增强基因序列信号强度,提高检测准确性,适用于荧光或显色检测。

  3. 酶活性研究

    • 作为酪氨酸激酶底物,通过磷酸化反应检测酶活性,研究催化机制。

  4. 药物研发

    • 靶向给药:生物素标记药物与肿瘤细胞表面受体结合的亲和素/链霉亲和素偶联,实现精准输送,降低副作用。

    • PROTAC技术:作为连接子(Linker),构建蛋白降解靶向嵌合体,诱导目标蛋白降解。

三、作用机制

  1. 标记过程

    • 特异性抗体与组织抗原结合 → 加入HRP标记二抗 → 添加生物素-酪氨酰胺 → H₂O₂和HRP催化酪氨酰胺生成自由基 → 自由基与邻近蛋白质共价结合 → 链霉亲和素-生物素-酶复合物显色。

  2. 信号放大原理

    • 每个HRP分子可催化多个生物素-酪氨酰胺分子沉积,形成局部高浓度标记,通过链霉亲和素-生物素系统进一步放大信号,突破传统酶扩增程序灵敏度限制。

四、使用注意事项

  1. 储存条件

    • 短期保存:4℃;长期保存:-20℃以下,避光、干燥,避免反复冻融。

  2. 操作规范

    • 避免形成灰尘和气溶胶,接触前需获得特别说明;在通风良好环境中使用。

  3. 安全提示

    • 仅供科研使用,不可用于人体实验、药物开发或商业用途。

关于我们:

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