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cas:851113-28-5,Biotin-XX Tyramide Reagent,生物素-XX 酪胺试剂的特点

2025-11-21 [19]

Biotin-XX Tyramide Reagent 是一种用于酶介导的酪酰胺信号放大(TSA)的生物素衍生物,其核心特性、应用领域及操作注意事项如下

一、核心特性

  1. 化学结构

    • 由酚基、酪酰胺核心和长链亲水生物素(Biotin-XX)组成,分子式为 C₃₀H₄₇N₅O₅S,分子量 589.79

    • 长链结构(XX)提供柔性空间,使生物素远离反应位点,降低空间位阻对链霉亲和素结合的影响。

  2. 物理性质

    • 形态:淡黄色至淡棕色固体或粉末。

    • 溶解性:易溶于有机溶剂(如DMSO、DMF)及部分水溶性缓冲液,溶解度≥59 mg/mL(DMSO)。

    • 稳定性:干燥状态下稳定,需低温(-20℃)避光保存;水溶液或含过氧化氢体系中酚基易氧化,需新鲜配制或避光操作。

    • pH适应性:常用缓冲液范围为pH 7–9,生物实验条件下稳定,不影响靶分子结构。

  3. 反应活性

    • 在过氧化物酶(如HRP)催化下,酚基氧化生成酚氧自由基,与靶分子(如蛋白质或核酸)上的酪氨酸残基共价结合,实现局部高密度标记。

    • 生物素基团可与链霉亲和素-荧光素、链霉亲和素-HRP等探针结合,实现多重信号放大和多模态检测。

结构式:
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二、应用领域

  1. 免疫组化(IHC)

    • 信号增强:通过HRP催化酪酰胺自由基生成,实现抗原位点的高密度标记,结合链霉亲和素-荧光素或酶探针,显著提高低丰度蛋白检测的灵敏度和准确性。

    • 低抗体浓度应用:在无需较高灵敏度的场景中,可降低抗体或探针浓度,减少非特异性结合和交叉反应。

  2. 原位杂交(ISH)

    • 基因表达分析:标记靶核酸分子,实现基因表达的定量和定位分析,尤其适用于荧光检测中克服组织自发荧光背景干扰。

  3. 蛋白质组学研究

    • 高灵敏度标记:结合TSA技术,对低丰度蛋白质进行高灵敏度检测,为蛋白质相互作用和表达谱分析提供工具。

  4. 细胞表面蛋白标记

    • 膜不可渗透性:长链亲水结构使其无法进入细胞,仅标记细胞表面蛋白,避免胞内蛋白干扰,适用于细胞表面受体研究。

三、操作注意事项

  1. 储存条件

    • 短期保存:4℃;长期保存:-20℃以下,避光、干燥,避免反复冻融。

  2. 安全防护

    • 操作时佩戴手套和防护眼镜,避免长期吸入、皮肤接触或摄入;在通风良好环境中使用。

  3. 溶液配制

    • 水溶液或含过氧化氢体系中酚基易氧化,需新鲜配制或避光操作,确保反应效率和标记特异性。

  4. pH控制

    • 使用pH 7–9的缓冲液,避免pH影响靶分子结构或试剂稳定性。

  5. 多重标记兼容性

    • 可与荧光标记试剂、酶标记试剂等联合使用,实现多重标记和检测,需根据实验需求优化条件。

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