脱硫生物素-二聚乙二醇-酰胺-二苯并环(Desthiobiotin-PEG2-CONH-DBCO)是一种重要的多功能生物偶联试剂。
化学结构与组成:由脱硫生物素、二聚乙二醇(PEG2)、酰胺键(CONH)和二苯并环辛炔(DBCO)组成。脱硫生物素是生物素的类似物,缺少硫原子,但仍能与链霉亲和素和亲和素等蛋白质特异性结合;二聚乙二醇是由两个乙二醇单元组成的柔性链段,可增加分子的水溶性;酰胺键起到连接不同结构单元的作用,影响分子的稳定性和化学反应性;二苯并环辛炔是具有反应活性的基团,能与叠氮基团发生点击化学反应。
物理性质:通常为白色或无色固体粉末。其分子量为 631.77,分子式为 C35H45N5O6。由于含有二聚乙二醇部分,在水中有一定的溶解性,同时在二甲基亚砜、N,N - 二甲基甲酰胺等有机溶剂中也有较好的溶解度。
化学性质:二苯并环辛炔能与含有叠氮基团的化合物发生高效的点击化学反应,形成稳定的三唑环结构。酰胺键可以在一定条件下发生水解反应,生成相应的羧酸和胺,也可参与缩合反应形成新的酰胺键。脱硫生物素能与亲和素、链霉亲和素等蛋白质高亲和力、特异性结合。
合成方法:通常先将脱硫生物素的羧基通过 NHS 或 EDC 等活化试剂转化为活性酯,然后使用 H2N-PEG2-COOH 作为连接臂,两端分别与脱硫生物素和二苯并环的氨基反应,二苯并环部分需预先修饰为氨基或羧基衍生物,最后通过 HATU 或 PyBOP 等缩合剂将上述模块通过酰胺缩合反应连接起来。
应用领域:在生物标记与检测中,可利用脱硫生物素与链霉亲和素的高亲和力,用于 ELISA、免疫荧光等检测技术中标记生物分子;在药物递送系统中,二聚乙二醇增强水溶性,二苯并环结构可负载疏水药物,形成靶向纳米载体;在蛋白质工程中,可作为蛋白质交联剂或定点修饰工具;在材料科学中,二苯并环的刚性结构可用于构建功能化高分子材料。
储存条件:建议储存在 - 20℃的低温条件下,避光、避湿保存,避免频繁的溶解和冻干,以保持其稳定性和活性。
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