cas：129179-83-5，Biotin-HPDP，生物素修饰3-(2-吡啶二硫)丙酰胺的应用

Biotin-HPDP（生物素-二硫吡啶）是一种巯基反应性的生物素化试剂，以下是对其的详细介绍：

一、基本信息

• 中文名称：生物素-二硫吡啶

• 英文名称：Biotin-HPDP

• CAS号：129179-83-5

• 分子式：C24H37N5O3S3

• 分子量：539.77

• 外观：白色固体

• 溶解性：水不溶性，需溶于二甲基亚砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF）等有机溶剂后，再稀释于水性缓冲液中使用。

结构式：

二、结构组成

Biotin-HPDP由三部分共同组成：

• 双环生物素环结构：作为生物素的核心部分，具有与亲和素/链霉亲和素的高亲和力。

• 附着在生物素戊酸侧链上的1,6-二氨基己烷：作为连接臂，增加生物素与巯基反应性基团之间的距离，减少空间位阻。

• 侧链末端的巯基反应性基团（吡啶基二硫化物）：能够与蛋白或其他分子上的游离巯基（-SH）反应，形成稳定的二硫键，并释放吡啶-2-硫酮。

三、反应特性

• 反应活性：Biotin-HPDP末端的吡啶基二硫化物能够与蛋白或其他分子上的游离巯基反应，形成稳定的二硫键。

• 可逆性：形成的二硫键可被还原剂（如二硫苏糖醇，DTT）裂解，释放原始未修饰的生物分子，适用于需要回收原始分子的实验。

• 反应条件：在pH 6.5至7.5的缓冲液（如PBS）中反应效果较佳。避免使用含硫醇或二硫化物还原剂的缓冲液，以免干扰反应。反应温度通常为室温或25℃，反应时间根据实验需求调整（如90分钟至数小时）。

四、应用优势

• 长侧链设计：使生物素标记的分子能够更好地与亲和素（avidin）或链霉亲和素（streptavidin）探针结合，提高检测灵敏度。

• 膜渗透性：Biotin-HPDP是一种膜渗透性试剂，可用于需要回收原始生物分子的标记和亲和纯化。

• 标记效率高：由于长侧链减少了空间位阻，Biotin-HPDP的标记效率较高。

五、操作注意事项

• 溶解方法：溶解时可用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻，以促进溶解。

• 储存条件：本品应密封避光，储存于阴凉、干燥、通风处。避免频繁解冻，建议分装后-20℃以下冰冻保存。

• 安全防护：操作时需佩戴手套和护目镜，避免直接接触皮肤或眼睛。废弃物需按实验室安全规范处理。

• 纯化步骤：反应后需通过透析、超滤或柱层析等方法去除未结合的Biotin-HPDP，避免干扰后续实验。

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