cas:1032732-74-3,Biotin-4-fluorescein,生物素-4-荧光素的介绍
2025-12-05
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Biotin-4-fluorescein(生物素-4-荧光素)是一种结合生物素(Biotin)与荧光素(Fluorescein)的生物共轭物,其分子式为 C₃₃H₃₂N₄O₈S,分子量为 644.69 g/mol,外观呈橙色粉末状,可溶于二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等有机溶剂。
一、核心特性
双功能标记
生物素端:与亲和素(如链霉亲和素)结合力较强(结合常数Kd∼10⁻¹⁵ M),可实现靶向捕获或富集。
荧光素端:激发波长为 492 nm,发射波长为 518 nm,荧光信号强且稳定,适用于荧光显微镜、流式细胞术等检测技术。
高灵敏度与特异性
与亲和素结合时,荧光信号可被特异性淬灭(淬灭率达 84-88%),通过荧光恢复或强度变化实现定量检测。
适用于复杂样本中低丰度目标的检测,如细胞表面标记物、稀疏核酸序列等。
小分子优势
相比长链生物素衍生物,其分子尺寸更小,减少空间位阻,避免与亲和素结合时的抗协同效应,确保结合效率与稳定性。
结构式:
二、应用方向
分子生物学与生物化学
蛋白质标记:标记目标蛋白后,通过亲和素系统实现纯化、定位或相互作用研究。
核酸标记:标记DNA/RNA探针,用于荧光原位杂交(FISH)或实时定量PCR(qPCR)。
细胞成像:追踪细胞内生物素化分子的动态分布,如受体内吞、囊泡运输等。
诊断与检测
亲和素/链霉亲和素定量:通过荧光淬灭效应,建立均相荧光检测法,快速测定样本中亲和素浓度。
生物素衍生物检测:作为标准品或探针,检测生物素化分子(如生物素化抗体、药物载体)的含量。
药物研发与纳米技术
靶向递送:修饰药物载体(如脂质体、纳米颗粒)表面,通过生物素-亲和素系统实现靶向释放。
纳米材料功能化:标记纳米颗粒后,利用荧光信号追踪其体内外行为,优化设计参数。
三、使用注意事项
储存条件
短期保存:4℃冷藏,避光干燥。
长期保存:-20℃以下冰冻、干燥、避光,建议充入惰性气体(如氩气)保护,防止荧光素降解。
有效期:自接收日起 12个月内使用,避免反复冻融。
溶液配制
工作液制备:用无水DMSO、DMF或100%甲醇溶解,配制成 1 mM 浓储液,分装后冷冻保存。
稀释使用:根据实验需求,用缓冲液(如PBS)稀释至工作浓度,避免直接稀释浓储液导致沉淀。
实验操作
荧光检测:使用黑色微孔板(减少背景干扰),设置激发波长 492 nm、发射波长 518 nm、截止波长 500 nm。
避免光漂白:检测过程中尽量缩短光照时间,或使用抗淬灭封片剂。
pH敏感:反应体系pH应控制在 6.5-7.5,过高或过低会影响生物素-亲和素结合效率。
安全提示
仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
操作时佩戴防护手套与护目镜,避免直接接触皮肤或吸入粉末。
关于我们:
陕西星贝爱科生物科技经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记物、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近红外荧光染料,聚苯乙烯微球,上转换纳米发光颗粒,MRI核磁造影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。
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