1628029-01-5，UV-Tracer Biotin NHS Ester，紫外追踪-生物素-NHS酯的概述

紫外追踪-生物素-NHS酯（UV-Tracer Biotin NHS ester）是一种结合生物素、NHS酯活性基团与紫外追踪功能的生物分子标记试剂。

一、化学特性

• 核心结构：由三部分组成，包括生物素（Biotin）、NHS酯基团和紫外追踪基团。

• 生物素（Biotin）：提供与链霉亲和素（Streptavidin）或抗生物素蛋白（Avidin）的高亲和力结合能力，用于后续的分离或检测。

• NHS酯基团：与生物分子（如蛋白质、多肽）的伯胺基（-NH₂）反应，形成稳定的酰胺键共价连接。

• 紫外追踪基团：嵌入二苯甲酮类荧光片段，在紫外光下发出蓝色荧光，用于标记效率的实时监测。

• 物理性质：通常为淡黄色或白色粉末，溶于水及部分有机溶剂（如二甲基亚砜DMSO、N,N-二甲基甲酰胺DMF）。

结构式：

二、功能

• 共价结合：通过NHS酯基团与目标分子的伯胺基反应，实现生物素和荧光基团的共价标记。

• 荧光示踪：在紫外光激发下发出荧光，可直接监测标记效率，无需额外荧光染料。

• 光交联：光照后，荧光基团产生活性中间体（如氮宾），与邻近分子形成共价交联，可“锁定"瞬时相互作用。

三、应用场景

• 蛋白质标记：标记蛋白质后，通过链霉亲和素富集目标蛋白复合物，用于免疫分析（如Western Blot、ELISA），提高检测灵敏度。

• 核酸标记：标记寡核苷酸，用于荧光原位杂交（FISH）或测序分析。

• 活细胞成像：追踪细胞表面蛋白分布、内吞途径或信号通路动态。

• 蛋白质相互作用研究：结合光交联技术，捕获瞬态相互作用，用于蛋白质组学研究。

• 传感器开发：构建高灵敏度生物传感器，用于检测病原体或生物标志物。

• 靶向递送：修饰纳米载体，实现药物或基因的靶向输送。

四、使用注意事项

• 溶解性：NHS酯基团对水分敏感，易水解失效。溶解时应优先使用无水DMSO或DMF，再稀释至缓冲液。从冰箱取出后，应室温回温30-60分钟再开盖，防止水汽凝结。

• 反应条件：反应pH值应调至7.0-8.5（中性/微碱性），避免使用含氨基的缓冲液（如Tris），可改用碳酸盐缓冲液（pH 9.0）。若目标分子缺乏伯氨基或氨基被屏蔽，应改用针对其他基团的生物素化试剂。

• 标记效率验证：通过紫外吸收、荧光检测或Western Blot等方法验证标记效果。

• 储存条件：应保存在-20°C以下，避光、避湿。取用时需保持干燥，避免频繁的溶解和冻干。

• 安全防护：操作时应佩戴适当的防护装备，如实验手套、护目镜等，避免吸入、接触皮肤和眼睛。

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