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cas:41994-02-9,生物素-酪氨,Biotinyl Tyramide的特点

2025-12-06 [33]

生物素-酪氨(Biotinyl Tyramide)是一种结合了生物素(Biotin)与酪氨(Tyramide)的生物标记试剂,在生物化学和生物医学研究中具有广泛应用,尤其在信号放大技术中表现突出。

一、结构特性

生物素-酪氨由生物素与酪氨通过共价键连接而成,分子式为C₁₈H₂₅N₃O₃S,分子量为363.48。其结构包含两部分:

  • 生物素部分:具有特殊的五元环与六元环相连结构,赋予其与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)较高的亲和力(结合常数Kd≈10⁻¹⁵ M),形成稳定复合物。

  • 酪氨部分:作为过氧化物酶(如辣根过氧化物酶,HRP)的底物,含有活性酚羟基,可在HRP催化下生成高活性自由基,与周围生物分子共价结合。

结构式:
image.png

二、作用机制

生物素-酪氨的核心功能是通过酪胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)技术实现信号增强,其过程如下:

  1. HRP催化反应:HRP标记的抗体或探针识别靶点后,在过氧化氢(H₂O₂)存在下,催化生物素-酪氨的酪氨部分生成高活性自由基。

  2. 共价沉积:自由基与靶点附近的蛋白质或核酸中的酪氨酸残基共价结合,将生物素标记固定于靶区域。

  3. 二级信号放大:通过链霉亲和素偶联物(如荧光染料、酶或金属粒子)结合生物素,进一步放大信号,提高检测灵敏度。

三、应用领域

生物素-酪氨因其高灵敏度和特异性,广泛应用于以下领域:

  1. 免疫组织化学(IHC)

    • 检测低表达抗原,减少非特异性背景信号。

    • 克服固定程序不理想或靶蛋白表达水平低导致的弱免疫标记问题。

  2. 荧光原位杂交(FISH)与原位PCR

    • 增强核酸探针的信号,便于观察核酸分布和表达情况。

  3. 蛋白质组学研究

    • 标记特定蛋白质或肽段,研究蛋白质相互作用、定位及翻译后修饰。

  4. 细胞生物学研究

    • 标记细胞表面分子,追踪其动态变化及与其他分子的相互作用。

  5. 药物研发

    • 作为药物载体,通过靶向识别肿瘤细胞表面受体,实现精准药物递送。

  6. 多重染色与电镜免疫标记

    • 在多轮免疫染色中作为稳定标记形式,或配合金标链霉亲和素用于高分辨率定位。

四、储存条件

为保持生物素-酪氨的稳定性,需遵循以下储存条件:

  • 温度:建议避光保存于-20℃以下,部分产品可短期储存于-15℃。

  • 避光防潮:防止光照和潮湿环境导致分解。

  • 溶剂:通常以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂,需密封保存以避免挥发。

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