cas:41994-02-9,生物素-酪氨,Biotinyl Tyramide的特点
2025-12-06
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生物素-酪氨(Biotinyl Tyramide)是一种结合了生物素(Biotin)与酪氨(Tyramide)的生物标记试剂,在生物化学和生物医学研究中具有广泛应用,尤其在信号放大技术中表现突出。
一、结构特性
生物素-酪氨由生物素与酪氨通过共价键连接而成,分子式为C₁₈H₂₅N₃O₃S,分子量为363.48。其结构包含两部分:
生物素部分:具有特殊的五元环与六元环相连结构,赋予其与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)较高的亲和力(结合常数Kd≈10⁻¹⁵ M),形成稳定复合物。
酪氨部分:作为过氧化物酶(如辣根过氧化物酶,HRP)的底物,含有活性酚羟基,可在HRP催化下生成高活性自由基,与周围生物分子共价结合。
结构式:
二、作用机制
生物素-酪氨的核心功能是通过酪胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)技术实现信号增强,其过程如下:
HRP催化反应:HRP标记的抗体或探针识别靶点后,在过氧化氢(H₂O₂)存在下,催化生物素-酪氨的酪氨部分生成高活性自由基。
共价沉积:自由基与靶点附近的蛋白质或核酸中的酪氨酸残基共价结合,将生物素标记固定于靶区域。
二级信号放大:通过链霉亲和素偶联物(如荧光染料、酶或金属粒子)结合生物素,进一步放大信号,提高检测灵敏度。
三、应用领域
生物素-酪氨因其高灵敏度和特异性,广泛应用于以下领域:
免疫组织化学(IHC):
检测低表达抗原,减少非特异性背景信号。
克服固定程序不理想或靶蛋白表达水平低导致的弱免疫标记问题。
荧光原位杂交(FISH)与原位PCR:
增强核酸探针的信号,便于观察核酸分布和表达情况。
蛋白质组学研究:
标记特定蛋白质或肽段,研究蛋白质相互作用、定位及翻译后修饰。
细胞生物学研究:
标记细胞表面分子,追踪其动态变化及与其他分子的相互作用。
药物研发:
作为药物载体,通过靶向识别肿瘤细胞表面受体,实现精准药物递送。
多重染色与电镜免疫标记:
在多轮免疫染色中作为稳定标记形式,或配合金标链霉亲和素用于高分辨率定位。
四、储存条件
为保持生物素-酪氨的稳定性,需遵循以下储存条件:
温度:建议避光保存于-20℃以下,部分产品可短期储存于-15℃。
避光防潮:防止光照和潮湿环境导致分解。
溶剂:通常以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂,需密封保存以避免挥发。
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