851113-28-5,Biotin-XX Tyramide Reagent ,生物素-XX 酪酰胺试剂的性质
2025-12-07
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生物素-XX 酪酰胺试剂(Biotin-XX Tyramide Reagent,CAS号:851113-28-5)是一种用于生物分子标记和检测的生化试剂。
一、基本性质
分子结构:由酚基、酪酰胺核心和长链亲水生物素(Biotin-XX)组成。长链结构(XX)提供柔性空间,使生物素远离反应位点,降低空间位阻对链霉亲和素结合的影响。
分子式与分子量:分子式为C₃₀H₄₇N₅O₅S,分子量约为589.8。
物理形态:淡黄色至淡棕色固体或粉末。
溶解性:易溶于有机溶剂(如DMSO、DMF)及部分水溶性缓冲液,溶解度≥59 mg/mL(DMSO)。
稳定性:干燥状态下稳定,需低温(-20℃)避光保存;水溶液或含过氧化氢体系中酚基易氧化,需新鲜配制或避光操作。
pH适应性:常用缓冲液范围为pH 7–9,生物实验条件下稳定,不影响靶分子结构。
结构式:
二、核心功能
信号放大:在过氧化物酶(如HRP)催化下,酚基氧化生成酚氧自由基,与靶分子(如蛋白质或核酸)上的酪氨酸残基共价结合,实现局部高密度标记。生物素基团可与链霉亲和素-荧光素、链霉亲和素-HRP等探针结合,实现多重信号放大和多模态检测。
提高检测灵敏度:通过HRP催化酪酰胺自由基生成,实现抗原位点的高密度标记,结合链霉亲和素-荧光素或酶探针,显著提高低丰度蛋白检测的灵敏度和准确性。
降低抗体浓度:在无需较高灵敏度的场景中,可降低抗体或探针浓度,减少非特异性结合和交叉反应。
膜不可渗透性:长链亲水结构使其无法进入细胞,仅标记细胞表面蛋白,避免胞内蛋白干扰,适用于细胞表面受体研究。
三、应用领域
免疫组织化学(IHC):用于检测低丰度抗原,通过生物素-XX酪酰胺的级联放大,提高检测灵敏度。
荧光原位杂交(FISH):结合荧光标记的链霉亲和素,增强核酸信号,实现基因表达的定量和定位分析,尤其适用于荧光检测中克服组织自发荧光背景干扰。
蛋白质印迹(Western Blot):提高低表达蛋白的检测灵敏度。
基因表达分析:标记靶核酸分子,实现基因表达的定量和定位分析。
细胞成像实验:通过标记细胞内的特定分子,使得研究人员能够更直观地观察和研究细胞内的生物学过程。
四、操作注意事项
存储条件:建议存放于-20℃以下环境,保持冰冻、干燥,并避光保存。短期保存可置于4℃。
溶解与使用:本产品溶于部分有机溶剂,使用过程中务必保持产品干燥,避免阳光直射。避免频繁解冻,建议现配现用,确保产品性能稳定。
安全防护:操作时佩戴手套和防护眼镜,避免长期吸入、皮肤接触或摄入;在通风良好环境中使用。
缓冲液选择:使用pH 7–9的缓冲液,避免pH影响靶分子结构或试剂稳定性。
多重标记:可与荧光标记试剂、酶标记试剂等联合使用,实现多重标记和检测,需根据实验需求优化条件。
关于我们:
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