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Cyanine3 tetrazine,花青素3-四嗪的概述

2026-03-14 [28]

Cyanine3 tetrazine 是一种结合了 Cyanine3(Cy3)荧光染料 和 四嗪(Tetrazine) 基团的功能性化合物,广泛应用于生物分子标记、荧光成像和生物正交化学等领域。以下是关于该化合物的详细介绍:

一、化学结构与组成

  1. Cyanine3(Cy3)荧光染料

    • 属于菁类染料,具有明亮的橙红色荧光。

    • 激发波长约 550 nm,发射波长约 570 nm

    • 荧光亮度高、光稳定性好,且对生物分子的毒性较低,适合用于生物样品的荧光标记与成像。

  2. 四嗪(Tetrazine)基团

    • 是逆电子需求 Diels-Alder 反应(IEDDA)的关键反应伙伴。

    • 可与反式环辛烯(TCO)发生极快速的反应,该反应无需催化剂,在生理条件下即可进行,且特异性较高。

结构式:

image.png

二、物理化学性质

  • 外观:深红色固体。

  • 分子量662.28

  • 分子式C39H44ClN7O

  • 溶解性

    • 可以在非水环境以及含有一些有机助溶剂(如乙腈或 DMSO)的水性介质中进行标记。

    • 对于纯水介质中的反应,可以使用该试剂的磺化版本,以提高水溶性。

  • 稳定性

    • 在避光、低温条件下储存稳定,避免强光和高温造成性能下降。

    • 建议分装保存,避免反复冻融。

三、核心特性与应用

  1. 高效荧光标记

    • Cyanine3 tetrazine 兼具 Cy3 的荧光成像能力和四嗪的高效点击反应活性,可实现对生物分子的高度选择性标记。

    • 适用于蛋白质、多肽、核酸等生物分子的标记,通过荧光成像技术观察其在细胞或生物体内的分布和动态变化。

  2. 生物正交反应

    • 四嗪基团可与 TCO 修饰的生物分子发生快速、特异性的 IEDDA 反应,无需催化剂,反应条件温和。

    • 适用于活细胞或活体中的原位标记,对细胞损伤小,背景干扰低。

  3. 活细胞与活体成像

    • 在活细胞成像中,可实时监测生物分子的动态分布和相互作用。

    • 在活体成像中,可实时追踪药物载体或探针的体内分布和靶向结合过程。

  4. 多重荧光成像

    • Cy3 的荧光波长位于可见光区,可与其他波长的荧光染料(如 Cy5、FITC)搭配使用,实现对多种生物分子的同时特异性标记与成像。

  5. 免疫分析与定量检测

    • 可用于标记 TCO 修饰的抗体或抗原,通过荧光信号检测实现对目标分析物的高灵敏度定量分析。

四、特点

  • 荧光性能优异:Cy3 的橙红色荧光适配活细胞成像,光毒性低,高量子产率与光稳定性支持长时间、高信噪比成像。

  • 反应高效特异:四嗪-TCO 反应速率极快,无需铜催化剂或高温,生物相容性优异,适合活体应用。

  • 水溶性与稳定性好:双磺酸基团提升水相稳定性,适用于水性生物系统,化合物保存期长,实验重复性好。

  • 模块化与通用性强:可与多种靶向分子(抗体、多肽、核酸)或功能模块(药物、成像探针)配对,实现“先靶向,后标记"的灵活策略。

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